جداسازي و كشت اوليه سلول‏هاي ستيغ عصبي از لوله عصبي جنين جوجه

هدف:  هدف از اين مطالعه ارائه يك روش ساده و كارآمد جهت جداسازي و تعيين خصوصيت سلول‏هاي ستيغ عصبي از بافت لوله عصبي مي‏باشد. مواد و روش‏ها: تخم مرغ‏هاي نطفه‏دار حدود 35 ساعت در دماي 38 درجه سانتي‏گراد و رطوبت نسبي 55 تا 60 درصد در داخل انكوباتور قرار داده شدند تا جنين‏ها به‏مراحل 10-12 طبق جدول تكاملي هامبورگرهاميلتون رسيدند. سپس جنين‏ها از روي سطح زرده تخم مرغ جداسازي شده  و لوله عصبي از جنين جوجه جدا و به‏مدت 24 ساعت در ظروف كشت سلولي، كشت داده شد تا سلول‏هاي ستيغ عصبي از آن جدا شوند. آن‏گاه لوله عصبي از كف ظروف كشت جدا و خارج شد و به سلول‏ها به‏مدت 5 روز اجازه تكثير و ازدياد داده شد. در نهايت اين سلول‏ها جمع‏آوري شدند و جهت ارزيابي پروفايل بيان ژن، PCR صورت گرفت.نتايج: سلول‏هاي ستيغ عصبي از لوله عصبي جدا شده و در شرايط كشت گسترش يافتند. اين سلول‏ها هم‏چنين نشانگرهاي Slug، Sox9 و Sox10 را به‏روش RT-PCR بيان كردند.نتيجه‏گيري: سلول‏هاي ستيغ عصبي مي‏توانند در محيط آزمايشگاهي از لوله عصبي رها شده و در شرايط كشت مناسب و ساده تكثير و گسترش يابند.