ساخت ناقل‌هاي حاوي تركيبات ژني WRI1 و LPAAT و انتقال آن‌ها به گياه توتون

در گياهان دانه‌روغني تعدادي از ژن‌هاي دخيل در مسير ساخت تري‌آسيل‌گليسرول شناسايي شده‌اند كه تغيير در بيان اين ژن‌ها سبب افزايش محتواي روغن دانه شده است. ژن‌هاي WRI1 و LPAAT از ژن‌هاي كليدي در اين مسير سنتزي هستند كه بيش‌بيان اين ژن‌ها مي‌تواند سبب افزايش محتواي روغن شود. در اين تحقيق به‌منظور افزايش ميزان روغن دانه، ناقل‌هاي بياني حامل ژن‌هاي WRI1 و LPAAT طراحي و ساخته شدند. ژن‌هاي سنتزي WRI1 و LPAAT با استفاده از آنزيم‌هاي برشي اختصاصي از ناقل همسانه‌سازي PGH.WRI1 و PGH.LPAAT جدا و به‌صورت منفرد و جفتي در ناقل حد‌واسط PGH.O3.2.2 كه حامل پيشبرهاي اختصاصي SBP و Napin و خاتمه‌گر E9 مي‌باشد، همسانه‌سازي شدند. كاست‌هاي ژني به ناقل بياني دوگانه pBin19 وارد شدند. ناقل‌هاي نهايي بهAgrobacterium tumefacience سويه EHA105 منتقل و جهت بررسي صحت ساخت و بيان قطعه ژني، در تراريختي گياه مدل توتون به‌كار گرفته شدند. ارزيابي مولكولي گياهان تراريخت، حضور و فعاليت ژن WRI1 و LPAAT را تأييد كرد. بذور حاصل از گياهان تراريخت در نسل بعد در محيط كشت حاوي كانامايسين، گياهچه‌هايي سالم و قوي توليد كردند.