ارزيابي فيتوشيميايي، آنتي‌اكسيداني و اثر مهاري عصاره گياه دارويي Citrullus colocynthis L. بر توليد نانوبيوفيبريل‌هاي آميلوئيدي از آلبومين سرم گاوي به‌عنوان يك پروتئين مدل

Phytochemical evaluation and antioxidant and inhibitory effects of Citrullus colocynthis L. extract on production of amyloid nano–biofibrils from bovine serum albumin as a model protein

هندوانه ابوجهل با نام علمي Citrullus colocynthis L.، يكي از گياهاني است كه اثرات آنتي اكسيداني و ضدديابتي آن در پژوهش‌هاي قبلي به اثبات رسيده است. در اين پژوهش ضمن بررسي فيتوشيميايي عصاره هيدروالكلي هندوانه ابوجهل، اثرات آنتي‌اكسيداني و مهاري آن بر توليد نانوبيوفيبريل‌هاي آميلوئيدي از آلبومين سرم گاوي به‌‌عنوان يك پروتئين مدل مورد بررسي قرار گرفته است. ميوه گياه در پائيز 1396 از مناطق بياباني اطراف قم جمع آوري، خشك و سپس به روش ماسراسيون عصاره گيري گرديد. آناليز تركيبات ثانوي عصاره با روش كروماتوگرافي گازي-طيف سنجي جرمي انجام شده و ميزان كمي مهمترين تركيبات آن شامل سيترولين و سيترونلول با استفاده از HPLC ازيابي گرديد. فعاليت آنتي‌اكسيداني عصاره با استفاده از روش DPPH بررسي شد و سپس رشته‌هاي آميلوئيدي در لوله آزمايش و در دماي بالا و pH پائين تهيه و از تصوير برداري ميكروسكوپ الكتروني براي تائيد حضور رشته‌ها استفاده شد. از روش طيف‌سنجي كنگورد براي بررسي اثرات مهاري عصاره بر توليد رشته‌هاي آميلوئيدي استفاده شد. نتايج نشان داد كه متيل بتا دي گالاكتوپيرانوزيد و بتا دي گلوكوپيرانوزيد به ترتيب با 51/29 و 31/6 درصد از فراوان‌ترين تركيبات شيميايي و تترادكانوئيك اسيد با 31/16 و سپس اكتا و هگزادكانوئيك اسيد به ترتيب با 11/14 و 94/10 درصد، بيش‌ترين تركيبات يافت شده در عصاره بودند. مقادير سيترولين و سيترونلول نيز در عصاره به ترتيب 0041/0 و 013/0 ميلي‌گرم بود. بيش-ترين خاصيت آنتي‌اكسيداني در غلظت 10 ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر از عصاره و به ميزان 5/71 درصد و بيش‌ترين ميزان مهار توليد رشته‌هاي آميلوئيدي در غلظت يك ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر و به ميزان 99 درصد ديده شد. عصاره ﻫﻨﺪواﻧﻪ اﺑﻮﺟﻬﻞ با حضور تركيبات آنتي اكسيدان قوي و نيز اثرات مهاري كه بر توليد رشته‌هاي آميلوئيدي دارد، اثرات مناسبي در كاهش عوارش ناشي از بيماري آلزايمر دارد.

Citrullus colocynthis L. is one of the plants that it's anti–oxidant and anti–diabetic effects has been proven in previous studies. In this study, in addition to the phytochemical study of hydro– alcoholic extract of Colocynth, its anti–oxidant and inhibitory effects on the production of amyloid nanobiofibrils from bovine serum albumin as a model protein have been investigated. The fruit plant was collected from the desert areas around Qom in fall 2017. After drying, the extraction was performed by maaceration method. The secondary compounds of the extract were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry and the amount of its most important compounds including citrulline and citronellol was obtained by HPLC. The antioxidant activity of the extract was evaluated using DPPH method, then the amyloid fibrils were prepared in the test tube at high temperature and low pH and electron microscopy imaging was used to confirm the presence of the fibrils. Congored spectroscopy was used to investigate the inhibitory effects of the extract on the production of amyloid fibrils. The results showed that methyl betagalactopyranoside (29.51%) and beta-diglucopyranoside (6.31%) were the most abundant chemical compounds and tetradcanoic acid (16.31%) and then octa (14.11%) and hexadecanoic acid (10.94%) were the most compounds found in the extract. The levels of citrulline and citronellol in the extract were 0.0041 and 0.013 mg, respectively. The highest anti–oxidant activity was at a concentration of 10 mg/ml of the extract (71.5%) and the highest inhibition of amyloid fibers production was at a concentration of 1 mg/ml (99%). Therefore, colocynth extract with the presence of potent anti–oxidant compounds and its inhibitory effects on the amyloid fibers production, may be useful in reducing the incidence of Alzheimer's disease.