بررسي ميزان آلودگى گوشت گاوهاى ذبح‌شده در كشتارگاه صنعتى اروميه به انگل ساركوسيست با روش PCR و مقايسه با دو روش ماكروسكوپي و هضمي

A survey on Sarcocystis contamination in slaughtered cattle by PCR method in Urmia abattoir and comparing with macroscopic and microscopic methods

ساركوسيستيس (Sarcocystis sp.) يكى از مهم‌ترين تك­ ياخته ­هاى متعلق به شاخه Apicomplexa مى ­باشد كه در بين حيوانات خونگرم در كليه نقاط جهان شايع بوده و داراى اهميت زئونوتيك مى­ باشد. سه گونه­ Sarcocystis bovicanis، S. bovifelis و S. hominis در گاو شناسايى شده است. با توجه به بالا بودن ميزان آلودگى لاشه­ هاى گاوهاى كشتارى در ايران به ساركوسيست، ميزان آلودگى گوشت گاوهاى ذبح‌شده در كشتارگاه صنعتى اروميه به اين انگل با استفاده از روش مولكولي PCR بررسي شد و كارايي اين روش با دو روش ماكروسكوپي و هضمي (ميكروسكوپي) در تشخيص ميزان آلودگي به اين انگل مقايسه شد. در مجموع 80 نمونه از زبان و مري اخذ شده از 40 لاشه مورد مطالعه قرار گرفت. براي بررسي مولكولي، DNA انگل با دستورالعمل كيت استخراج شد و قطعه ژن 18sRNA با استفاده از پرايمر­هاى اختصاصى تكثير شد و در ادامه با آنزيم ­هاى محدودكننده محصولPCR هضم شد و الگوى شكسته شدن آن‌ها مورد ارزيابى قرار گرفتند. نتايج تحقيق حاضر نشان داد كه از مجموع 40 رأس گاو نمونه­ بردارى شده، در روش هاى ماكروسكوپيك و ميكروسكوپيك ميزان آلودگى به‌ترتيب 2/5 و 72/5 درصد بود. هم‌چنين تعداد 36 رأس گاو ازلحاظ آلودگى با روش PCR مثبت گزارش گرديد كه 90 درصد كل گاوها را شامل مى­ شود. نتايج تحقيق حاضر نشان داد قدرت تشخيص روش مولكولي بيشتر از دو روش ديگر مي ­باشد و ميزان آلودگي بافت زبان در هر دو جنسيت نر و ماده بيشتر (0/05>P) از ميزان آلودگي بافت مري است. مي‌توان به اين جمع‌بندي رسيد كه براي رديابي موثر ساركوسيست، امكان استفاده از روش PCR به موازات روش‌هاي متداول وجود دارد.

Sarcocystis is one of the most important protozoa belonging to the phylum Apicomplexa, which is common among warm-blooded animals in all parts of the world, some of which are of zoonotic importance. Sarcocystis cruzi, S. bovifelis, and S. hominis are recognized in cattle. Due to the high occurrence of Sarcocystis in cow carcasses slaughtered in Iran, this study was conducted to investigate the contamination of Sarcocystis in beef slaughtered in Urmia industrial slaughterhouse using PCR. Also, the efficiency of the PCR method was compared with macroscopic and digestive (microscopic) methods. For this, a total of 80 esophageal and tongue samples, obtained from 40 carcasses was assayed. The Sarcocystis DNA was extracted according to the instructions of the Qiagen kit and the 18sRNA gene fragment was used using specific primers. The DNA product was digested with restriction enzymes, and their fracture pattern was evaluated. Out of 40 carcasses, in macroscopic and microscopic methods 2.5% and 72.5% were found positive for Sarcocystis, respectively. Besides, 36 cows were reported positive in terms of PCR contamination, which is 90% of the total samples. The results showed that the efficiency of PCR in detecting Sarcocystis is higher than the other two methods (P<0/05). Moreover, it was revealed that the tongue contamination in both male and female cattle carcass was higher (P<0/05) than the level of esophageal contamination. It was concluded that for efficient detection of Sarcocystis in cattle carcass, PCR can be applied along with the conventional methods.