بررسي اثرات چندشكلي‌هاي ژن‌هاي ATPase6 و ATPase8 بر بلوغ برون‌تني تخمك‌ و كشت برون‌تني جنين‌ در گوسفند سنجابي

هدف: ميتوكندري به دليل نقش هاي مهمي كه در متابوليسم سلول دارد و به دليل اينكه عمدتا از طريق مادر در حيوانات به ارث مي رسد، يك منبع عالي براي توضيح وراثت سيتوپلاسمي است. در حيوانات اهلي مطالعات مختلفي ارتباط بين چندشكلي‌هاي DNA ميتوكندري و صفات توليدي و توليد مثلي را گزارش كرده اند. هدف از اين مطالعه بررسي چندشكلي ژن‌هاي ATPase6 و ATPase8 و اثر آنها بر ميزان موفقيت بلوغ برون‌تني تخمك‌ها (IVM) و كشت برون‌تني جنين‌ها (IVC) در گوسفندان سنجابي بود. مواد و روش‌ها: نمونه‌هاي خون و تخمدان ميش‌هاي بالغ از كشتارگاه بيستون واقع در كرمانشاه جمع آوري شد. در آزمايشگاه پس از جداسازي بافت اضافي پيرامون تخمدان‌ها و شستشوي آنها، مجموعه كومولوس تخمك‌هاي با قطر بيشتر از 3 ميلي متر از فوليكول‌ها آسپيراسيون شد. تعداد 100 نمونه كه تعداد بيش از دو تخمك داشتند، به ديش‌هاي حاوي محيط بلوغ انتقال داده شدند. بعد از بلوغ تخمك‌ها، براي لقاح برون تني هر نمونه، از اسپرم تازه قوچ سنجابي استفاده شد. براي كشت برون تني، زيگوت‌هاي تشكيل شده در مرحله قبلي در محيط مايع تخمداني سنتز شده به مدت 48 ساعت كشت داده شدند. استخراج DNA با استفاده از روش نمكي انجام شد. قطعه 895 جفت بازي از DNA ميتوكندري كه شامل ژن‌هاي ATPase6 و ATPase8 بود با استفاده از PCR تكثير شدند و نمونه‌ها با استفاده از يك روش تغيير يافته SSCP ژنوتيپ شدند. براي بررسي ارتباط الگوهاي مشاهده شده با نرخ بلوغ و كشت رويان از آزمون ناپارامتري كروسكالواليس استفاده شد. نتايج: نتايج اين مطالعه وجود چند شكلي‌ها در نواحي ژني مورد مطالعه را نشان داد و پنج الگوي مختلف باندي A (50 درصد) ، B (12 درصد) ، C (9)، D (21) و E (8 درصد) براي ژنها مشاهده شد. تجزيه و تحليل ارتباط اين الگوها با نرخ بلوغ و كشت رويان حاكي از نبود ارتباط معني دار بين آنها بود (p 0.05). نتيجه‌گيري: با وجود مشاهده چندشكلي در ژن‌هاي ATPase6 و ATPase8 با استفاده از روش تغيير يافته SSCP، اين چندشكلي هاي تاثيري بر نرخ بلوغ و كشت رويان نداشتند.