طراحي سازه ژني تركيبي جهت توليد نوتركيب باكتريوسين لاتروسپورولين و آناليز بيوانفورماتيكي پيش ساز پروتئيني با هدف بررسي نقش انتهاي آميني دمين 2SH

باكتريوسين­ ها پپتيدهاي توليد شده توسط باكتري ­ها مي­ باشند كه فعاليت ضدميكروبي اين پپتيدها بر عليه باكتري ­ها و قارچ­ ها شناخته شده است. به­ منظور توليد مقادير بالاي باكتريوسين با استفاده از فناوري DNA نوتركيب و نياز به خنثي كردن اثر سمي پپتيد و توليد فرم محلول پروتئين مي ­توان از برخي پپتيدها كه به ­عنوان چاپرون ­ها عمل مي ­كنند، استفاده نمود. لاتروسپورولين يك باكتريوسين 49 اسيدآمينه ­اي مي ­باشد كه به ­طور طبيعي از باكتري 9-Brevibacillus laterosporus GI ترشح مي­ شود. در مطالعه حاضر، براي اولين بار از انتهاي آميني دمين 2SH به ­عنوان قطعه پپتيدي كمكي جهت توليد نوتركيب باكتريوسين لاتروسپورولين استفاده شد. در اين مطالعه سازه ژني تركيبي به­ صورت پيش­ ساز پروتئيني حاوي دنباله هيستيديني، انتهاي آميني دمين 2SH (2N-SH)، جايگاه برش پروتئاز انتروكيناز و در نهايت پپتيد لاتروسپورولين طراحي گرديد و به ­كمك آناليزهاي بيوانفورماتيكي اثر دمين 2N-SH بر حلاليت و سطوح آب گريز پروتئين هدف مطالعه شد. نتايج نشان داد دمين 2N-SH با دارا بودن سطوح مناسب آب گريز مي­ تواند به ­عنوان يك چاپرون مناسب، مانع از مجتمع شدن و به­ هم ريختگي ساختاري غيرقابل برگشت باكتريوسين لاتروسپورولين گردد. به ­علاوه آناليزهاي انجام شده نشان داد امكان بيان پروتئين هدف با تاخوردگي مناسب در شرايط آزمايشگاهي وجود دارد. مطالعه حاضر نشان داد دمين 2N-SH مي ­تواند به ­عنوان يك گزينه مناسب جهت توليد نوتركيب انواع باكتريوسين ­ها در باكترياشريشيا كلي عمل نمايد.

no abstract