بررسي آلودگي شيرهاي محلي كرمان به ليستريا مونوسيتوژنز به روش‌هاي فنوتيپي و مولكولي

ليستريا مونوسيتوژنز باكتري گرم مثبت و عامل بيماري ليستريوز در انسان و حيوان است و در بيشتر مواد غذايي از جمله لبنيات و شير حضور دارد. اين باكتري در گاو موجب سقط جنين و ورم پستان و در انسان منجر به مسموميت غذايي شده و مي­تواند در افراد پرخطر مانند زنان باردار، جنين و نوزاد تازه متولد شده به صورت مننژيت سپتي سمي مشاهده گردد. وجود اين باكتري به عنوان شاخص بهداشتي و آلودگي در شير تلقي مي­شود. در اين تحقيق 50 نمونه شير خام و غيرپاستوريزه موجود در سطح شهر كرمان جمع­آوري و با رعايت زنجيره سرد به آزمايشگاه منتقل گرديد. كشت بر روي محيط كشت اختصاصي ليستريا انجام و شناسايي فنوتيپي صورت پذيرفت. جهت شناسايي مولكولي، DNA باكتري­هاي شناسايي شده به روش فنوتيپي، با استفاده از كيت تجاري استخراج گرديد و تشخيص ليستريا مونوسيتوژنز با كاربرد كيت IGF اختصاصي شناسايي اين باكتري از شركت ايرانيان ژن فن­آوران صورت پذيرفت. محصول پي­سي­آر با ژل يك درصد الكتروفورز گرديد و باندهاي اختصاصي مشاهده گرديد. نتايج نشان داد 30 و 27 نمونه از شيرهاي غيرپاستوريزه به ترتيب بر اساس روش‌هاي انجام شده، كشت و پي‌سي‌آر نسبت به ليستريا مونوسيتوژنز آلودگي نشان دادند. اين امر توجه و رعايت شرايط بهداشتي را در طي مراحل توليد و تهيه شير و ضرورت استفاده از شير پاستوريزه را نشان مي‌دهد.

Listeria monocytogenes is a gram-positive bacterium that causes listeriosis in humans and animals and is present in most foods including dairy and milk. Listeria monocytogenes can cause abortion and mastitis in cattle. In humans, as well as infections in pregnant women, fetuses, and a newborn baby are seen as meningitis septicemia. Despite these microorganisms in milk can be considered as a health indicator. In this study, 50 samples of raw and unpasteurized milk in the city of Kerman were collected and transferred to the laboratory by observing the cold chain. The culture was performed on a Listeria-specific culture medium and phenotypic identification was performed. For molecular identification, the DNA of bacteria identified by the phenotypic method was extracted using a commercial kit. Listeria monocytogenes was detected by using a special IGF kit to identify this bacterium from the Iranian Gene Fanavaran Company. The PCR product was electrophoresed with 1% gel and specific bands were observed. The results showed that 30 and 27 samples of unpasteurized milk showed contamination against Listeria monocytogenes based on the methods performed, culture, and PCR, respectively. This shows the attention and observance of hygienic conditions during the production and preparation of milk and the necessity of using pasteurized milk.