تعيين هويت مولكولي مايكوباكتريوم توبركلوزيس كمپلكس هاي جدا شده از مسلولين استان خراسان رضوي

Molecular Identification of Mycobacterium Tuberculosis Complex, Isolated from Tuberculosis Patients of Khorasan Razavi

سل، بيماري زيونوزي است كه از ديرباز شناسايي شده و هنوز به عنوان يكي از مهم ترين بيماري هاي تهديد كننده مرگ خودنمايي مي نمايد. با وجود همه پيشرفت هايي كه در زمينه درمان اين بيماري حاصل شده است، سازمان بهداشت جهاني در سال 1993 از آن به عنوان بيماري با اولويت نخست مبارزه ياد نمود. در حال حاضر در بين عوامل عفوني سل دومين علت مرگ و مير به تنهايي است. از اين رو براي درمان موفق بيماري، تعيين هويت گونه هاي كمپلكس مايكوباكتريوم توبركلوزيس از اهميت ويژه اي برخوردار است. هدف از اين پژوهش شناسايي ملكولي گونه هاي مايكوباكتريايي در جدايه‍هاي مسلولين استان خراسان رضوي كه به آزمايشگاه رفرانس سل موسسه رازي ارسال شده اند، مي باشد. امروزه از روش هاي مختلف مولكولي به عنوان ابزار مفيد و سريعي براي شناسايي جدايه ها استفاده مي شود. در اين پژوهش، به منظور تشخيص هويت، ابتدا آزمون PCR بر روي ژن 16S rRNA تعداد 100 جدايه انجام شد و مشخص گرديد كه جدايه‍ها به جنس مايكوباكتريوم تعلق دارند. سپس با آزمون تكميلي IS6110 تعلق تمامي جدايه ها به مايكوباكتريوم توبركلوزيس كمپلكس به اثبات رسيد. همچنين براي افتراق ميان اعضاي كمپلكس از روش RD Typing استفاده شد و با استفاده از اين روش گونه اعضاي كمپلكس مشخص گرديدند. با استفاده از تعيين هويت مولكولي نمونه هاي ارسالي از استان خراسان رضوي مشخص گرديد كه تمامي جدايه ها مايكوباكتريوم توبركلوزيس مي باشند. نتايج فوق نشان داد كه مسلولين استان مورد آزمايش، به مايكوباكتريوم بويس و ديگر اعضاي كمپلكس آلوده نبودند. اين موضوع يا بدليل استفاده گسترده از شير پاستوريزه و عدم استفاده از شير آلوده به مايكوباكتريوم بويس و يا بدليل برنامه منظم كنترل و ريشه كني سل در اين شهر مي باشد. البته لازم به ذكر است اين مطالعه برروي تنها يكصد عدد از جدايه هاي افراد مسلول صورت گرفت و براي بررسي بيشتر به حجم بالاتري از جدايه هايي اين استان احتياج است.

Tuberculosis has long been recognized as one of the important threatening zoonotic diseases. Despite all the advances in its treatment; in 1993, WHO has announced that tuberculosis remains as the first major problem and the second cause of mortality by infectious agent in the world. Successful treatment of this disease, relies on the identification of species between Mycobacterium tuberculosis complexes. Regarding this matter, through application of molecular techniques, this research aims to identify the Mycobacterial isolates from Mashhad tuberculosis patients, which were submitted to the Reference Laboratory of Tuberculosis at Razi Vaccine and Serum Research Institutes. Nowadays, different molecular techniques are used as effective rapid tools for identification of Mycobacterial isolates. In this research, the initial PCR test for 16s rRNA gene of 100 isolates, revealed that all the isolates belonged to the Mycobacterium genus. Then, the supplementary test of IS6110 confirmed that all the isolates belonged to the Mycobacterium tuberculosis complex. Furthermore, the RD Typing techniques were used to differentiate between the species of complex and accordingly, they were identified. Results showed that all the one hundred isolates from Khorasan Razavi are Mycobacterium tuberculosis and the tested tuberculosis patients are not contaminated with Mycobacterium bovis or other species of the complex. This is either due to the widespread usage of pasteurized milk (instead of contaminated milk with Mycobacterium bovis) or due to the proper and regular “Control and Eradication Scheme” of bovine tuberculosis in this city. It should be noted that this study was done on merely 100 isolates of tuberculosis patients, however, further studies with higher sample size of isolates of this province is needed to find more reliable results.