فراواني آلودگي به تري تريكوموناس فتوس در گاوهاي شهرستان اصفهان

Frequency of Tritrichomonas foetus Infection in cows of Isfahan

تري تريكوموناس فتوس ، تك ياخته اي است كه معمولا در گاو بيماري توليدمثلي ايجاد كرده و باعث ناباروري و سقط جنين مي­گردد. روش مرسوم براي تشخيص آلودگي ، مشاهده مستقيم ميكروسكوپي و درصورت زمان محدود براي بررسي،انتقال به محيط انتقالي يا محيط كشت است . هدف از اين بررسي تنظيم روش مولكولي براي تشخيص آلودگي تريكوموناسي وتعيين ميزان آلودگي دركشتارگاه اصفهان بود. در اين بررسي از دو كشتارگاه متفاوت در شهرستان اصفهان 73 گاونر و27 گاوماده موردبررسي قرارگرفتند. با استفاده از سرنگ انسولين استريل و سواپ از رحم و مخاطات تناسلي نمونه گيري صورت گرفت. براي استخراج DNA براساس دستورالعمل شركت سازنده كيت اقدام گرديد(شركت سيناژن - ايران). آزمايش واكنش زنجيره ي پليمرازي (Nested PCR)، با بكارگيري پرايمرهاي اختصاصيRNA ريبوزومي تري تريكوموناس فتوس براي توالي جنس(TFR 1–2) وگونه(TFR3-4) صورت پذيرفت. همه نمونه ها با انجام آزمون Nested PCR مورد بررسي قرارگرفتند . تعداد 6 گاونر(2/8% )و2 گاوماده (4/7% ) با نشان دادن باند372 بازي آلودگي به جنس و2 گاونرنيز آلودگي به گونه فتوس تري تريكوموناس راباباند374 بازي نشان دادند.ساير نمونه ها با گونه هايي غير از گونه فتوس مرتبط بودند. بنابراين بر اساس نتايج اين تحقيق، شيوع جنس تري تريكوموناس و خصوصا تري تريكوموناس فتوس در نمونه ها ، تاييدكننده لزوم توجه جدي به آزمايشهاي غربالگري در گاو به خصوص گاوهاي نر مي باشد.

Tritrichomonas foetus is a protozoan parasite that has been traditionally identified as a cause of reproductive tract disease in cattle and may lead to Infertility and abortion. The most common and widely used method of T. foetus detection is direct microscopic examination. When specimens cannot be tested immediately after collection it is necessary to use transport medium or culture medium. This survey aimed to review the current status of Tritrichomonas foetus in Isfahan,Iran By Molecular Assay. Tritrichomonas foetus infection was investigated in 73 Bulls and 27 cows slaughtered in two abbattoir different. Mucus samples were obtained from the vagina and from the vagina and uterus, respectively, using a "screw-head scraper rod". Extraction of DNA from samples was carried out using a DNA extraction kit (Cinnagen, Iran), according to the manufacturer’s instructions. All samples were analyzed by Nested PCR technique using T. foetus-specific primers of Genus (TFR 1–2) and specie (TFR 3–4). All samples were analyzed by Nested PCR technique with the two sets of primers, respectively. Amplification products of 372 bp were observeded in 6 Bulls (8.2%) and 2 Cows (7.4%) isolates, with the genus specific primers and in 2 bulls also T. foetus yielded amplification products of the expected size (347 bp) showed. Other samples were related to non-T. foetus organisms. Therefore, based on the results of this survey, prevalence of Tritrichomonas genus and especially Tritrichomonas foetus in samples confirmed serious attention to screening test in bulls.