بررسي مولكولي ژن هاي slyA، stn، sopB، Phop/Q و spvc در سالمونلا تيفي موريوم جدا شده از نمونه هاي باليني با روش Multiplex PCR

Molecular survey of slyA, stn, sopB, Phop/Q and spvc genes of Salmonella typhimurium isolated from clinical samples by multiplex PCR

سابقه و هدف سالمونلا يك ارگانيسم روده اي گرم منفي و عامل بروز مسموميت هاي غذايي در انسان مي باشد. جنس سالمونلا داراي پنج ژن ويرولانس stn،Phop/Q ،spvc ، slyAو sopB مي باشد. اين ژن ها پروتيين هايي را در قسمت هاي مختلف باكتري كد مي نمايند كه مقابله با سيستم ايمني، كمپلمان و مرگ داخل سلول را باعث مي شوند. هدف از مطالعه حاضر شناسايي ژن هايويرولانسدر سويه هاي سالمونلاتيفي موريوم جدا شده از نمونه هاي باليني به روش Multiplex PCR و تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي مي باشد. مواد و روش ها در اين مطالعه توصيفي- مقطعي طي سال 1396 تعداد 60 نمونه مدفوع به منظور شناسايي سالمونلا تيفي موريوم از بيمارستان البرز شهر كرج جمع آوري شد. آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي روي محيط مولر هينتون آگار و بر اساس استاندارد (CLSI) انجام گرديد. آزمون Multiplex PCR جهت تشخيص ژن هاي ويرولانس با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي انجام شد. نتايج نتايج آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي نشان داد تمامي ايزوله ها داراي حساسيت به ايمي پنم، جنتامايسين و آميكاسين بودند. همچنين، فراواني ژن هاي Phop/Q، slyAوstn به ترتيب برابر 100، 87/3 و 91/6 1 درصد بود و ژن هاي sopB و Spvc در جدايه هاي سالمونلا تيفي موريوم مشاهده نگرديد. نتيجه گيري نتايج مطالعه حاضر حاكي از شيوع ژن هاي ويرولانس در سويه هاي باليني سالمونلاتيفي موريوم مي باشد كه مي تواند به عنوان زنگ خطري براي انتشار اين ژن ها به ديگر سروتيپ هاي سالمونلا باشد.

Salmonella is a Gram-negative intestinal organism and causes food poisoning in human. Salmonella has five virulence genes, stn, Phop/Q, spvc, slyA and sopB. These genes encode proteins in different parts of the bacteria that can confront with immune system, and the complement system and can cause death in the cell. The aim of this study was to detect slyA, stn, sopB, Phop/Q and spvc genes in Salmonella typhimurium strains isolated from clinical samples by the multiplex PCR method and to determine antibiotic resistance patterns. Material and Methods: In this descriptive cross-sectional study, in 2016, 60 stool samples in order to identify Salmonella typhimurium from Alborz-Karaj Hospital were collected. After confirmation of the strains by using standard biochemical and microbiological tests, an antibiotic susceptibility test was performed on a Muller Hinton Agar medium and based on Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. Multiplex PCR assay was performed to detect virulence genes using specific primers. Results: The results of the antibiotic susceptibility test showed that all isolates were sensitive to imipenem, gentamicin and amikacin. Also, molecular findings showed that the prevalence rates of Phop/Q, slyA and stn genes were 100%, 98.3%, and 91.6%, respectively. While sopB and Spvc genes were not observed in isolates of Salmonella typhimurium. Conclusion: The results of this study indicate that the prevalence of virulence genes in clinical Salmonella typhimurium isolates can serve as an alarm for the prevalence of these genes to the other Salmonella serotypes.