مطالعه مولكولي ژن‌هاي SCP, NP ,MEP در ترايكوفايتون روبروم و ترايكوفيتون منتاگروفايتس جداسازي شده از ضايعات درماتوفيتي

Molecular study of SCP, NP, MEP genes in Trichophyton rubrum and Trichophyton mentagrophytes isolated from dermatophyte lesions

تريكوفيتون روبروم و تريكوفيتون منتاگروفايتس از عوامل مهم عفونت هاي پوستي انسان و حيوان به شمار مي روند كه با بيان ژن هاي بيماريزا باعث ايجاد عفونت مي گردند. هدف از انجام اين تحقيق بررسي حضور و نقش ژن هاي بيماريزا در پاتوژنز اين قارچها بوده است. در اين مطالعه 48 نمونه تاييد شده از كلكسيون قارچ شناسي انستيتوپاستور تهيه شد. قارچها در محيط هاي اختصاصي كشت داده شدند و تست هاي افتراقي براي هر دو درماتوفيت انجام شد. . استخراج DNA با استفاده از كيت اختصاصي صورت گرفت. پي سي آر چندگانه با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي ژن هاي مورد نظربراي بررسي حضور ژن هاي مورد نظر انجام شد. نتايج بدست آمده از Multiplex PCR نشان داد كه در سويه هاي مورد بررسي mep4 و mep1,2,4 بيشترين حضور را به ترتيب در تريكوفيتون روبروم و تريكوفيتون منتاگروفايتس نشان دادند. نتايج حاصل از بررسي Multiplex PCR براي ژنهاي ScpA , B وژن Np حاكي از اين بود كه NP تقريبا در80% سويه هاي هر دو درماتوفيت وجود داشت. حضور مثبت ژن ScpA در 6 سويه ترايكوفيتون روبروم و 14 سويه ترايكوفيتون منتاگروفايتس ديده شد. داده هاي اين مطالعه مويد اثر سينرژيك ژن هاي بيماري زا بر روي يك ديگر در روند بيماري داشت. همچنين مطالعه حاضر اثبات نمود كه روش Multiplex PCR روشي دقيق و با صحت بالا است كه ميتواند با كاهش قابل توجه زمان تشخيص بيماري درماتوفيتوزيس موجب افزايش شانس درمان در بيماران مبتلا به اين بيماري شود.

Trichophyton rubrum and Trichophyton mentagrophytes are important causes of human and animal skin infections that cause infection by expressing pathogenic genes. The aim of this study was to investigate the presence and role of pathogenic genes in the pathogenesis of these fungies. In this study, 48 approved samples were obtained from the mycology collection of Pasteur Institute of Tehran. The fungies were grown in specific media and differential tests were performed for both dermatophytes. DNA extraction was performed using a special kit. Multiplex PCR was performed using specific primers to evaluate the presence of target genes. The results obtained from Multiplex PCR showed that in the studied strains mep4 and mep1,2,4 showed the highest presence in Trichophyton rubrum and Trichophyton mentagrophytes, respectively. The results of Multiplex PCR for ScpA, B and Np genes indicated that NP gene was present in approximately 80% of both dermatophyte strains. The presence of ScpA gene was observed in 6 strains of Trichophyton rubrum and 14 strains of Trichophyton mentagrophytes. The data of this study confirmed the synergistic effect of pathogenic genes in the pathogenesis process. The present study also proved that the Multiplex PCR method is an accurate and precise method that can increase the chances of treatment in patients with this disease by significant reducing the time of diagnosis of dermatophytosis.