مقايسه ي غلظت باقيمانده انروفلوكساسين در شير كارتيه هاي مبتلا به ورم پستان باليني و سالم متعاقب تجويز داخل عضلاني به روش HPLC

Comparison of Enrofloxacin concentration residue in milk of healthy and clinical mastitis quarters following intramascular administration by HPLC

مطالعات فارماكوكينتيكي داروها در بدن حيوانات سالم صورت مي­پذيرد. با توجه به اين كه در شرايط پاتولوژيك ميزان نفوذپذيري داروها به فضاهاي آناتوميك دستخوش تغييرات مي­شود، اطلاع از ميزان نفوذپذيري آنتي­ بيوتيك­ ها در غدد پستاني مبتلا به عفونت مي­تواند در انتخاب آنتي­ بيوتيك مؤثر باشد. هدف از اين مطالعه ارزيابي غلظت انروفلوكساسين در شير كارتيه­ هاي مبتلا به ورم پستان باليني و سالم پس از تجويز داخل عضلاني تك دوز دارو در گاوهاي شيري بود. براي انجام اين تحقيق از 6 رﺃس گاو هلشتاين شيروار مبتلا به ورم پستان درجه 2 باليني با عامل كلي فرمي، به روش آسپتيك نمونه شير اخذ و به صورت همزمان در محيط بلاد آگار و مك كانكي كشت داده شد، سپس سويه ­هاي كلي فرم جدا شده به آزمايشگاه رفرانس ارسال گرديد. بعد از تأييد عامل ورم پستان، انروفلوكساسين 5 درصد (هيپرالونا) با دوز mg/kg B.W 5 داخل عضلاني تزريق شد. سپس از كارتيه مبتلا و كارتيه ضربدري سالم در زمان‌هاي متفاوت نمونه‌ شير اخذ و براي آناليز به آزمايشگاه ارسال شد. باقي­مانده­ هاي انروفلوكساسين و متابوليت آن، سيپروفلوكساسين به روش استاندارد استخراج شد سپس غلظت داروها با روش كروماتوگرافي مايع با كاركرد بالا (HPLC) اندازه ­گيري شد. شرايط كروماتوگرافي شامل فاز متحرك متانول- استونيتريل با نسبت حجمي (v/v) 76:24 به روش ايزوكراتيك با سرعت جريانml/min 1 و شناساگر UV با طول موج 280 نانومتر بود. نتايج مطالعه ما نشان داد كه بين ميزان انروفلوكساسين در نمونه­هاي شير دو گروه در ساعات اندازه­ گيري شده تفاوت معني­داري وجود ندارد، در حالي كه مقدار سيپروفلوكساسين در ساعت 12 در نمونه­هاي شير اخذ شده از كارتيه ورم پستاني، به طور معني­داري بيش­تر از شير كارتيه­ هاي سالم بود. بر اساس داده­هاي به دست آمده از HPLC مي­توان نتيجه گرفت كه الگوي نفوذ انروفلوكساسين در كارتيه ­هاي سالم و مبتلا به ورم پستان باليني تفاوت معني­داري نداشت.

Pharmacokinetic studies of drugs from the body are done in healthy animals. Regarding the pathological changes in the permeability of drugs to the anatomical spaces, the knowledge about the rate of permeability of antibiotic to infected mammary glands can be effective in the selection of antibiotics. The aim of this study is to evaluate the amount of enrofloxacin in milk of healthy and clinical mastitis quarters after single dose intramasular injection in dairy cows. To do this research, from six Holstein lactating cattle with clinical grade 2 mastitis infected by E. coli, using aseptic method milk were taken and cultured in a blood Agar and McConkey environment. Finally, 6 isolates sent to the reference laboratory for approval. After confirming the cause of mastitis, Enrofloxacin 5% (hipralona) was injected intramuscularly at dose of 5 mg/kg B.W. Then, milk samples were taken at different times from healthy and clinical mastitis quarters and transferred to the laboratory to analyze. Enrofloxacin and its metabolite, Ciprofloxacin, were extracted by standard protocols. Then drug concentrations were measured using a high-performance liquid chromatographic (HPLC) method. Chromatographic conditions included a mobile phase as methanol-acetonitril solution (76:24 v/v) using an isocratic method with a flow rate of 1.0 ml/min and UV detection at 280nm. The results of our study showed that the amount of enrofloxacin in milk samples between two groups was not significantly different in hours of measurement. However, for ciprofloxacin at 12 h, it was significantly higher in milk of clinical mastitis quarters than in healthy ones. Based on the HPLC data, it can be concluded that the penetration pattern of enrofloxacin in healthy and clinical mastitis quarters had no significant difference.