شناسائي ملكولي گونه هاي بيماريزاي آناپلاسما در گاوهاي استان مازندران

Molecular Identification of Anaplasma pathogenic Species in cows in Mazandaran Province

هدف از اين مطالعه تعيين گونه‌هاي آناپلاسما در گاوهاي استان مازندران بود. براي اين منظور تعداد 105 نمونه خون از طريق رگ وداج گاو به طور تصادفي از نقاط مختلف استان مازندران جمع‌آوري گرديد. در ابتدا DNA استخراجي از نمونه‌هاي خوني با جفت آغازگري كه قطعه­ي 1468 جفت بازي از ژن 16S rRNA جنس آناپلاسما را تكثير مي‌كرد، تكثير شد. 29 نمونه (6/27 درصد) از 105 نمونه گاوي در اولين PCR و nested-PCR از نظر جنس آناپلاسما مثبت شدند. تمامي نمونه‌هاي مثبت با nested-PCR اختصاصي از نظر وجود آناپلاسما فاگوسيتوفيلم، آناپلاسما بوويس و آناپلاسما سنتراله (سويه آموري) بررسي شدند و 21 نمونه (20 درصد) از نظر آناپلاسما فاگوسيتوفيلم، 12 نمونه (4/11 درصد) از نظر آناپلاسما بوويس و 1 نمونه (1 درصد) از نظر آناپلاسما سنتراله (سويه آموري) مثبت تشخيص داده شد. DNA استخراجي نمونه‌هاي مثبت با استفاده از جفت آغازگرهاي اختصاصي كه قطعه 866 جفت بازي از ژن msp4 آناپلاسما مارژيناله را تكثير مي‌كرد، تكثير شد كه 5 نمونه (8/4 درصد) از 105 نمونه گاوي از نظر آناپلاسما مارجيناله مثبت بودند. اين مطالعه اولين تشخيص ملكولي گونه‌هاي آناپلاسما در گاوهاي استان مازندران بوده است. نتايج نشان مي‌دهد كه در بين درصد آلودگي گاو به آناپلاسما فاگوسيتوفيلم، در فصول مختلف سال و نوع دامداري، اختلاف معني‌دار وجود دارد. همچنين از نظر درصد آلودگي به آناپلاسما بوويس، از ميان متغير‌هاي مورد بررسي، بين فصول مختلف سال و نوع دامداري اختلاف معني‌دار وجود دارد.

This study aimed to determinate the variety of Anaplasma species among cows of Mazandaran province. For this purpose, 105 blood samples randomly collected via the jugular vein from different parts of Mazandaran province. The extracted DNA from blood cells was amplified by Anaplasma-all primers, which amplify an approximately 1468bp DNA fragment from a region of the 16S rRNA gene from various members of the genus Anaplasma. 29 (27.6%) out of 105 cow blood samples were Anaplasma spp. positive by first PCR and nested PCR. All cow positive samples were analysed for the presence of A. phagocytophilum, A.bovis, and A.centrale (Amori Strain) and as a result, 22 of blood samples (21%) for A.phagocytophilum, 12 (11.4%) for A.bovis and 1(1%) for A.centrale were positive. The extracted DNA from positive Anaplasma spp samples were amplified by Anaplasma marginale specific primers, which amplify an approximately 866bp DNA fragment from a region of the msp4 gene. Out of 105, blood samples, Five (4.8%) were positive for Anaplasma marginale. This study is the first molecular detection of Anaplasma species from cows in Mazandaran province. The results show that there is a significant difference between the percentage of infection of the cow with Anaplasma phagocytophilum, in different seasons of the year and the livestock type. Also, the percentage of infection with Anaplasma bovis, among the variables studied; there is a significant difference between the seasons of the year and the type of livestock.