بيان پروكاريوتي آنتي ژن نورآمينيداز ويروس آنفلوانزاي A (H5N1)

سابقه و هدف: ويروس آنفلوانزاي فوق حاد پرندگان A (H5N1) باعث ايجاد خسارات اقتصادي زيادي در سراسر جهان مي شوند و ممكن است در حيوانات درگردش باشد وتوانايي انتشار از انسان به انسان پيدا كند. بنابراين راه‌اندازي تست‌هاي تشخيصي براي كنترل عفونت آنفلوانزا ضروري است. مطالعات در مورد توالي اسيدهاي آمينه پروتئين نورآمينيداز (NA) ويروس آنفلوانزا نشان داده است كه NA ايمني زا‌ترين پروتئين در حيوانات است و مي‌تواند سيستم ايمني هومورال را تحريك نمايد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي ويروس آنفلوانزا (A/Indonesia/5/2005: H5N1) در pET21a كلون و در ميزبان (BL21)E. coli بيان شد. سپس ميزان بيان NA از نظر متغيرهاي غلظت القاگر IPTG و زمان بهينه‌سازي شد. يافته‌ها: نتايج، صحت ساختار Pet21aNA را نشان داد. باندهاي ظاهرشده با وزن مولكولي موردانتظار KDal)38) روي SDSPAGE با وسترن بلات تاييد شد كه بياني موفقيت‌آميز از پروتئين هدف درسويه E. coli BL21 بود. درتجزيه و تحليل درون رايانه‌اي، درستي اپي‌توپ عمده در ساختار نسخه NAتوليد شده دراين مطالعه را نشان داد. استنتاج: NAنوتركيب جديد مي‌تواند به‌طور مستقيم در آزمايشات سرولوژي براي تشخيص استفاده شود. همچنين مي‌تواند در معرض تهيه آنتي‌بادي پلي كلونال قرارگيرد، كه به عنوان ماده اساسي در تجزيه و تحليل وسترن بلات و ساير مطالعات ايمونولوژيك مانند ELISA، ايمونوسيتوشيمي استفاده شده است.