تغييرات بيان ژن سايتوكاين هاي IFN-γ و TNF-α منوسيت هاي شبه ماكروفاژ خون انسان در مجاورت نمونه هاي باليني و استاندارد سالمونلا تيفي در شرايط برون تن

Alterations in Gene Expression of Interferon and Tumor Necrosis Factor‐α in Human Blood Macrophage-Like Monocytes Induced by Clinical and Standard Salmonella typhi Strains in vitro

سالمونلا تيفي يك پاتوژن انساني است كه موجب تحريك سيستم ايمني انسان و ايجاد تغييرات در سطح بيان ژن ها در مسير بيماري زايي اش مي شود. لذا هدف اين مطالعه، بررسي تغييرات بيان ژن سايتوكاين هاي IFN-γ و TNF-α منوسيت هاي شبه ماكروفاژ خون انسان در برخورد با نمونه هاي باليني و استاندارد سالمونلا تيفي در شرايط برون تني است. مواد و روش كار در اين مطالعه مقطعي-توصيفي مدفوع 60 بيمار مبتلا به گاستروآنتريت كشت داده شده و براي تشخيص سالمونلا از تست هاي بيوشيميايي استفاده شد. همچنين از افراد نمونه خون وريدي براي جداسازي peripheral blood mononuclear cell (PBMC) گرفته شد و PBMCها در محيط كشت، حاوي تيمارهاي 4×103 cfu/mL از سالمونلا تيفي پاتوژن و استاندارد كشت شدند. تست سميت سلولي براي تعيين غلظت ها نيز انجام شد. در نهايت بيان كمي ژن هاي ifn-γ و tnf-α سنجيده شد و نتايج با آزمون هاي آماري، تحليل گرديد. يافته ها نتايج تست سميت سلولي، استفاده از غلظت 4×103 cfu/mL سالمونلا تيفي را براي تيمار در محبط كشت مجاز نشان داد كه استفاده شد. تغييرات نسبي بيان ژن سايتوكاين هاي tnf-α و ifn-γ در PBMCهاي تيمار شده با سويه پاتوژن و سويه 14028ATCC به ترتيب افزايش معناداري نسبت به نمونه كنترل داشت (0/0001=P، 0/0198= P). نتيجه گيري بيان افزايش يافته و معني دار سايتوكاين هاي ifn-γ و tnf-α در گروه نمونه تيمار شده با سويه پاتوژن و سويه ATCC نشان دهنده پلاريزاسيون ماكروفاژهاي تحريك شده با سالمونلا تيفي در شرايط آزمايشگاهي است.

Salmonella typhi as a human pathogen stimulates the human immune system and triggers gene expression changing its pathogenesis. Therefore, we aimed to investigate the expression levels of ifn-γ and tnf-α cytokines in human blood macrophage-like monocytes in dealing with clinical and standard samples of Salmonella typhi in vivo. Materials and Methods In this cross-sectional descriptive study, a total of 60 stool samples from patients with gastroenteritis were cultured and biochemical tests were used to diagnose Salmonella. Also, venous blood samples were taken for peripheral blood mononuclear cell (PBMC) isolation, and PBMCs were cultured in a culture medium containing 4×103cfu/mL treatments of Salmonella typhi pathogen and standard. Cytotoxicity tests were also performed to determine the concentrations. Finally, quantitative expression levels of ifn-γ and tnf-α were measured and the results were analyzed by statistical tests. Results The results of the cytotoxicity test showed the use of Salmonella typhi concentrations for treatment in an authorized culture medium at a concentration of 4×103 cfu / mL. In comparison to control samples, a significant increased expression levels of tnf-α gene have been detected in pathogen strain and ATCC strain (P<0.05) (P=0.0198). Furthermore, significantly increased expression levels of IFN-γ gene have been detected in the pathogen strain and ATCC strain (P<0.05) in comparison to the control sample (P=0.0001). Conclusion Increased and significant expression of ifn-γ and tnf-α cytokines in the sample group treated with pathogen strain and ATCC strain indicates polarization of macrophages stimulated by Salmonella typhi in vitro.