جدا سازي و شناسا يي مولكولي سلول هاي مخمر و ارزيابي آنها جهت توليد عصاره مخمر و بتا گلوكان

Isolation and molecular identification of yeast cells and their evaluation for producing yeast extract and beta glucan

امروزه سلول هاي مخمر‌ به علت توليدات مختلف از جمله توليد عصاره مخمر و بتا گلوكان يكي از قارچ هاي مهم در صنعت محسوب مي گردد. هدف از اين تحقيق جدا سازي و شناسايي سلول هاي مخمر و ارايه روش هاي جديد و عملي جهت توليد صنعتي عصاره مخمر و بتا گلوكان مي باشد. در اين مطالعه سلول هاي مخمر از نمونه هاي ميوه، سبزيجات و لبنيات جدا گرديد و تخريب ديواره سلولي آنها باروش هاي استفاده از اسيد، عصاره كيوي و تغيير فشار اسمزي انجام گرفت. بعلاوه براي جدا سازي و خالص سازي بتا گلوكان از روش تغيير يافته اسيد/قليا و براي تاييد از آزمون هاي كالوز و (H1NMR) Proton nuclear magnetic resonance استفاده گرديد. نتايج به دست آمده از اين تحقيق نشان داد كه سلول هاي مخمر از تمامي نمونه ها جدا گرديدند، اگرچه دو جنس مخمر به علت اندازه بزرگ و پتانسيل رشد سريع براي توليد عصاره مخمر و بتا گلوكان مناسب تشخيص داده شد. اين دو سلول مخمر بر اساس توالي ژن 18SrDNA ساكاروميسيس سرويسيه و كولوروميسس ماگسيانوس شناسايي شدند. بعلاوه روش هاي استفاده از عصاره كيوي و تغيير فشار اسمزي براي توليد عصاره مخمر با p≤0.05مناسب تشخيص داده شد. از طرف ديگر بر اساس نتايج آزمون هاي كالوز و H1NMR توليد و خالص سازي بتا گلوكان از ديواره اين مخمر ها مورد تاييد قرار گرفت كه مي تواند نويدي براي توليد اين محصولات در ابعاد صنعتي در كشور ايران در نظر گرفته شوند.

Yeast is a unicellular fungus with thick cell wall and nucleus. Nowadays this microorganism considered as important fungi in commercial industry because of their products specially yeast extract and beta glucan. The purpose of this study was isolation and identification and screening of yeast cells for production of beta glucan and yeast cells. Yeast cells were isolated from plant and dairy samples and destruction of their cell walls was carried out using acidic condition, kiwi extract and change of osmotic pressure methods. In addition, isolation, purification and verification of beta glucan were done by modified acid/alkaline and callose and Proton nuclear magnetic (H1NMR) methods respectively. The results obtained indicated that yeast cells were isolated from all samples. Two yeast cells based on their sizes and potential of growth were selected for further study. 18SrDNA gene sequencing of isolated strains identified them as Kluyveromyces marxianus and Saccharomyces cerevisiae. Our finding indicated that kiwi extract and change of osmotic pressure were favorable methods (p≤0.05) for production of yeast extract. Furthermore the results of Callose and H1NMR methods verified the production and purification of beta glucan. Hence based on our results production of beta glucan in industry scales is possible in our country Iran.