مقايسه روش هاي ميكروسكوپيك و ملكولي در تشخيص آناپلاسما مارجيناله و تعيين عوامل خطر مرتبط در گاوهاي استان سمنان

Comparison of microscopic and molecular methods in the diagnosis of Anaplasma marginale and determination of related risk factors in cattle in Semnan province

هدف از اين مطالعه تعيين شيوع آناپلاسما مارجيناله در جمعيت گاوهاي سنتي و نيمه‌صنعتي استان سمنان بود. در مجموع تعداد 208 نمونه خون از طريق رگ گوش و رگ وداج گاوهاي به‌ظاهر سالم به‌طور تصادفي به ترتيب براي آزمون ميكروسكوپي و ملكولي اخذ شد. DNA استخراجي از نمونه‌هاي خوني با جفت آغازگري كه قطعه حدود 866 جفت بازي از ژن msp4 آناپلاسما مارجيناله را تكثير مي‌كرد، تكثير شد و 2/45 درصد از نمونه‌ها از نظر آناپلاسما مارجيناله مثبت تشخيص داده شدند. آزمون مربع كاي جهت مقايسه ميزان شيوع نسبت به اقليم، ارتفاع از سطح دريا، طول جغرافيايي، عرض جغرافيايي، فصل، نوع دامداري از نظر مديريت، سطح بهداشت دامداري، ناقلين موجود در دامداري، تراكم گله سن، جنس، توليد شير انجام شد. در آزمون لجستيك چند متغيره عرض جغرافيايي، نوع دامداري از نظر مديريت، ناقلين موجود در دامداري، سن و توليد شير عوامل خطر مهم براي ابتلا به آناپلاسما مارجيناله معرفي شدند (0.05>P). در مقايسه با آزمون ملكولي، حساسيت و ويژگي آزمون ميكروسكوپي به ترتيب 9/31 و 4/54 درصد تعيين گرديد. محاسبه ضريب كاپا بين آزمون ملكولي و ميكروسكوپي آناپلاسما مارجيناله (50 فيلد) نشان‌دهنده سطح ناچيز توافق دو آزمون بود (0.13= Kappa). اين مطالعه اولين مطالعه تشخيص ملكولي آناپلاسما مارجيناله در گاوهاي استان سمنان است. تحقيقات ديگري در جهت شناسايي ناقلين، اثر متقابل ميزبان- ناقل و شناسايي واريته هاي ژنتيكي كه ممكن است حضور و گسترش گونه‌هاي آناپلاسما را در گاوهاي استان سمنان تحت تأثير قرار دهند موردنياز است.

This study aimed to determine the molecular prevalence of Anaplasma marginale among cattle of Semnan province. A total of 208 blood samples were randomly collected via the ear vein and jugular vein from healthy cattle for microscopy and molecular examination, respectively. The extracted DNA from blood cells was amplified by a pair of primer, which amplify an approximately 866bp DNA fragment from the region of the msp4 gene of A. marginale and 45.2% of cattle blood samples were identified positive for A. marginale. Chi-square tests were used to compare molecular prevalence values relative to climate, altitude, longitude, latitude, season, farm-type, hygiene of the farm, vectors, farm density, age, sex, and milk yield. The significant major risk factors of A. marginale in cattle were identified as latitude, farm-type, vectors, age, and milk yield by the multivariable logistic regression analysis (P< 0.05). The examination of 50 microscopic fields showed 31.9% sensitivity and 54.4% specificity compared to molecular examination. The Kappa coefficient between molecular and microscopy (50 fields) techniques indicated a slight level of agreement (Kappa= 0.13). This study is the first molecular detection of A. marginale from cattle in Semnan province, Iran. Further researches are needed to determine the vectors, vector-host interactions, and genotypic variants that may affect the presence and distribution of Anaplasma species in Semnan province.