بررسي بيان ژن‌هاي اينترلوكين 10 و TNF-α در ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان در پاسخ به عفونت ويروسي سپتي سمي خونريزي دهنده (VHS)

TNF-α and interleukin 10 genes expression in rainbow trout in response to viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) infection

در ميان عملكردهاي متابوليكي ضروري كبد، نقش اين بافت به عنوان يك ميانجي‌گر در سيستم ايمني نيز مورد توجه قرار گرفته است. اگرچه حضور و نقش سيتوكين‌ها‌ و كموكين‌ها در سيستم ايمني پستانداران به خوبي مورد ارزيابي قرار گرفته ولي مطالعات اندكي در اين زمينه در ماهيان انجام شده است. ژن‌هاي دخيل در سيستم ايمني مانند اينترلوكين 10 و TNF-α نقش مهمي در سيستم ايمني سلول‌هاي مختلف دارند. در پژوهش حاضر، ميزان بيان ژن‌هاي اينترلوكين 10 و TNF-α در ماهيان قزل‌آلاي رنگين كمان در روز هشتم پس از چالش با ويروس VHS مورد ارزيابي قرار گرفت. تعداد شش نمونه از هر كدام از دو گروه كنترل و آلوده شده به ويروس VHS انتخاب و سپس استخراج RNA از بافت كبد نمونه‌ها انجام گرفت. بيان افتراقي ژن‌هاي اينترلوكين 10 وTNF-α بين دو گروه آلوده شده به ويروس و گروه كنترل با استفاده از Real-Time PCR مورد ارزيابي قرار گرفت. مقايسه تغييرات نسبي بيان ژن‌ها با استفاده از روش‌هاي آماري در سه تكرار از هر نمونه انجام شد. آناليز داده‌ها نشان داد كه بيان ژن‌هاي اينترلوكين 10 و TNF-α در پاسخ به عفونت ويروسي سپتي سمي خونريري‌دهنده افزايش يافت. در اين مطالعه اگر چه بيان هر دو ژن اينترلوكين 10 و TNF-α، افزايش معني‌داري داشته است، اما ميزان بيان ژن اينترلوكين 10 در گروه تيمار 25 برابر بيشتر از گروه كنترل بوده است. افزايش بيان اين دو سايتوكين، خصوصا القاء بيش از حد بيان اينترلوكين 10 توسط ويروس ممكن است منجر به تضعيف عملكرد سيستم ايمني شود. به طور كلي بررسي تغييرات بيان نسبي ژن‌هاي سيتوكيني مي‌تواند دانش ما در فهم مكانيسم مولكولي عملكرد سيستم ايمني در مقابل پاتوژن‌ها را افزايش دهد. در اين صورت مي‌توان با توسعه نشانگرهاي مولكولي به منظور افزايش مقاومت به بيماري‌هاي ويروسي در برنامه‌هاي به‌نژادي در صنعت پرورش ماهي بهره گرفت.

Among the essential metabolic functions of the liver, the role of this tissue as a mediator in the immune system has also been considered. Although the role of cytokines and chemokines in mammalian immune systems has been well evaluated, few studies have been performed in fish. Genes involved in the immune system, such as interleukin 10 and TNF-α, play an important role in the immune system of various cells. In the present study, the expression of interleukin 10 and TNF-α genes in rainbow trout was assessed following VHS virus treatment. Six samples from each of two control group and infected group with VHS virus were selected and then total RNA was extracted from liver tissue. The differential expression of interleukin 10 and TNF-α genes between the two studied groups (infected with the virus vs control) was assessed using Real-Time PCR. Comparison of relative changes in gene expression were assessed by statistical methods in three replications of each sample. Analysis of data showed that the expression of interleukin 10 and TNF-α genes increased in response to VHS virus. In this study, although the expression of both interleukin 10 and TNF-α genes were significantly increased, but the rate of interleukin 10 expression in the treatment group was 25 times higher than the control group. Increased expression of these two cytokines, in particular over induction of interleukin 10 expression by the virus may lead to impaired of immune function. As a final conclusion, studying the relative changes of cytokine genes expression can increase our knowledge on molecular mechanism of immune function against pathogens. In this case, it is possible to develop molecular markers in order to increase resistance to viral disease in breeding programs of industrial fish farming.