اثر تركيبي آنتي‌اكسيدان ميتوكندريايي 4،2-دي نيتروفنول و لوتئولين بر فرآسنجه‌هاي عملكردي اسپرم خروس نژاد راس طي نگهداري در دماي ºC4

Combination effect of mitochondrial antioxidant 4,2-dinitrophenol and luteolin on functional parameters of Ross rooster sperm during storage at 4 ºC

در فرآيند نگهداري اسپرم توليد ROS و كاهش فعاليت آنتي‌اكسيداني، موجب آسيب به اسپرم مي‌شود. بيشترين آسيب به دليل توليد فراوان ROS و عدم نفوذپذيري آنتي‌اكسيدان‌ها به داخل ميتوكندري است. بمنظور كاهش آسيب‌هاي اكسيداتيو در سطح گسترده از تركيبات آنتي‌اكسيداني مختلفي استفاده‌شده است. اين مطالعه اثر افزودن سطوح مختلف تركيب آنتي‌اكسيدان 4،2-دي‌نيتروفنل و لوتئولئين در رقيق‌كننده مني، بر فرآسنجه‌هاي عملكردي اسپرم خروس در شرايط نگهداري برون تني در دماي °C4، بمدت 48 ساعت مورد بررسي قرار گرفت. نمونه‌هاي مني از 15 قطعه خروس در سن 28 هفتگي جمع‌آوري شدند. پس از ارزيابي‌هاي اوليه، نمونه‌هاي مني با يكديگر مخلوط شدند. پس از رقيق‌سازي نمونه‌ها و افزودن سطوح تيمار 1 (0/5 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنل+5/0 ميكرومولار لوتئولين)، تيمار 2 (0/50 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنول+0/75 ميكرومولار لوتئولين)، تيمار 3 (0/5 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنل+1 ميكرومولار لوتئولين)، تيمار 4 (0/75 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنول+5/0 ميكرومولار لوتئولين)، تيمار 5 (75/0 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنل+75/0 ميكرومولار لوتئولين) و تيمار 6 (0/75 نانومولار 2-4، دي‌نيتروفنول+1 ميكرومولار لوتئولين) از آنتي‌اكسيدان‌هاي تركيبي و نگهداري نمونه‌ها در دماي °C4 بمدت 48 ساعت، فرآسنجه‌هاي كيفي و كمي در زمان‌هاي صفر، 24، 48 ساعت پس از نگهداري در دماي °C4، ارزيابي شدند. نتايج نشان دادند كه پارامتر‌هاي ارزيابي‌شده در اثر گذر زمان كاهش معني‌داري داشتند (p<0/05). نمونه‌هاي تيمار شده با آنتي‌اكسيدان تركيبي سبب افزايش معني‌داري پارامترهاي اندازه‌گيري شده مستقل از زمان و اثر متقابل تيمار در زمان شد (05/0 P<). همچنين افزودن تيمار 3، 4، 5 و 6 باعث كاهش معني‌دار غلظت مالون‌دي‌آلدهيد شدند و تيمار 6 باعث كاهش معني‌دار اسپرم‌هاي ناسالم شد (p<0/05).

In the process of sperm storage, production of reactive oxygen species (ROS) and reduction of antioxidant activity cause sperm damage. The most damage related to high ROS production and inadequate antioxidant penetration into mitochondria attacks this organelle. Combination of antioxidants was used to reduce oxidative damage. This study investigated the effect of different levels of combination of targeted antioxidant 2, 4-dinitrophenol and non-targeting luteolin on semen dilution on sperm parameters under in vitro storage at 4°C for 48 h. Semen samples were collected from 15 rooster at 28 weeks of age. After initial evaluations, semen samples were mixed with each other. After diluting the samples and adding different levels of antioxidants, treatment 1 (0.5 nM 4,2-di-nitrophenol + 1 μM luteolin), treatment 2 (0.5 nM 4,2-di-nitrophenol +3 μM luteolin), treatment 3 (0.75 nM) 4,2-Ditrophenol + 1 μM luteolin), 4 (0.75 nM 4,2-Dithinrophenol +3 μM luteolin) from combined antioxidant and storage of samples at 4°C for 48 h in refrigerator quantitative parameters were evaluated at 1, 24, 48 h after storage at 4°C. The parameters evaluated had a significant decrease over time. But the samples treated with the combination antioxidant significantly increased (P <0.05) in the measured parameters independent of the time and the interaction effect of the treatment on time. Also, addition of 3, 4, 5 and 6 treatments significantly decreased malondialdehyde concentration and treatment's 6 significantly decreased unhealthy spermatozoa (P <0.05).