انتخاب بهترين محيط باززايي و بررسي تأثير وراپاميل بر روي پاسخ دفاعي ريزنمونه‌هاي تلقيح شده با Agrobacterium tumefaciens در گياه گوجه‌فرنگي(Solanum lycopersicum)

The Selection of the best regeneration medium and evaluation of the effect of verapamil on the plant defense response in the explants inoculated with Agrobacterium tumefaciens in tomato (Solanum Lycopersicum)

به منظور بهينه نمودن شرايط كشت بافت گياه گوجه‌فرنگي (Solanum lycopersicum)، تأثير13 تركيب هورموني مختلف و دو ريزنمونه كوتيلدون و هيپوكوتيل بر روي ميزان باززايي سه رقم نيوتون، اين‌فينيتي و دافينس، مورد بررسي قرار گرفت. آزمايش به صورت فاكتوريل و بر پايه طرح كاملاً تصادفي با سه تكرار انجام شد. بيشترين ميزان ساقه‌زايي (11/9 ساقه در هر ريزنمونه) در مورد رقم دافينس بر روي محيط كشت پايه MS حاوي هورمون‌هاي 0/1=NAA و 0/68=TDZ ميلي‌گرم در ليتر و ريزنمونه كوتيلدون، به دست آمد. پاسخ‌هاي دفاعي گياه در مقابل عوامل محيطي، يكي از عوامل بازدارنده باززايي ريزنمونه‌ها در كشت بافت گياهي است. سيگنال‌دهي يون كلسيم يكي از وقايع اوليه و البته مهم‌ترين واقعه در ايجاد پاسخ دفاعي گياه در مقابل عوامل محيطي از جمله پاتوژن‌هاست، از اين رو تأثير تركيب دارويي وراپاميل (Verapamil) به عنوان بلوكه‌كننده كانال‌هاي كلسيمي بر روي پاسخ دفاعي گياه، در اين تحقيق مورد بررسي قرار گرفت. براي اين منظور تلقيح ريزنمونه‌ها با Agrobacterium tumefaciens سويه LBA4404 و بر اساس شرايط بهينه شده كشت بافت، انجام شد. تأثير وراپاميل در چهار غلظت 0، 50، 100 و 200 ميلي‌گرم در ليتر در محيط هم‌كشتي، مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه استفاده از وراپاميل در مقايسه با نمونه شاهد، موجب كاهش پاسخ دفاعي گياه مي­شود. همچنين استفاده از غلظت 50 ميلي‌گرم در ليتر وراپاميل موجب افزايش ميزان باززايي شد.

To optimize tomato (Solanum Lycopersicum) plant tissue culture condition, the effect of 13 different hormonal combinations and two explants of cotyledon and hypocotyl on the regeneration rate of three Newton, Infinity and Defines cultivars were investigated. Experiments were conducted in a factorial based on a completely randomized design with three replications. The highest shoot number (11.9 shoots per explant) was obtained for Defines cultivar on MS medium containing the hormones of TDZ=0.68, NAA=0.1milligrams per liter and cotyledon explant. Plant defense responses against environmental factors are one of the inhibitor factors of explants regeneration in plant tissue culture. Calcium ion signaling is one of the primary events and, of course, the most important event in plant defense response against pathogens, Therefore, the effect of verapamil as a calcium channel blocker was investigated on the plant defense response. For this purpose, inoculation was performed using Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 and based on optimized tissue culture condition. The effect of verapamil in four concentrations of 0, 50, 100 and 200 milligrams per liter was investigated in a co-culture medium. Results showed that the use of verapamil in comparison with the control sample reduced the plant defense response. Also, the use of 50 milligrams per liter of verapamil increased the amount of regeneration