بررسي اثرات هم افزايي كوركومين با داروي سيس‌­پلاتين بر بيان ژن Cdc42 در سلول­‌هاي رده Calu-6 كارسينوماي ريه در انسان

Study of Cisplatin effects in comparison with Curcumin on Cdc42 gene expression in human Calu-6 lung carcinoma cell line

سرطان ريه دومين سرطان شايع است. ناكارآمد بودن درمان ها و عوارض جانبي داروهاي شيمي درماني، اهميت مسير درمان را صدچندان مي نمايد. هدف اين مطالعه بررسي اثر كوركومين و مقايسه اثر آن با داروي سيس پلاتين و نيز اثر تركيب همزمان آن ها بر رده سلولي Calu-6 و بيان ژن Cdc42 است. رده سلولي اپي تليالي Calu-6 رده سلولي كارسينوماي ريه انسان است كه قبل و بعد از تيمار با دوز µg/ml 0/5 تا 8 كوركومين و µg/ml 0/1 تا 50 سيس پلاتين و تيمار با تركيب هر دو طي 24 و 48 ساعت، شمارش و ميزان بقاي سلولي به وسيله روش MTT بررسي شد. براي بررسي آپوپتوز و تغيير بيان ژن Cdc42، كه يك GTPase از خانواده Rho ها است و در سرطان هاي مختلف افزايش مي يابد، از تكنيك هاي فلوسايتومتري و Real time PCR استفاده و داده ها توسط نرم افزارهاي GraphPad prism، Flowing software، Linreg، Excel و Rest آناليز شد. در سلول هاي تيمار شده با دوز µg/ml 0/67 كوركومين و µg/ml 1/7 سيس پلاتين (كمترين دوزهاي موثر) طي 24 ساعت كاهش زنده ماني سلول ها و همچنين القاي مرگ سلولي نيز مشاهده شد به طوريكه بيشترين مقدار آپوپتوز اوليه و آپوپتوز با تاخير به ترتيب مربوط به تيمار با كوركومين و تركيب همزمان كوركومين و سيس پلاتين بود. همچنين هم سيس پلاتين و هم كوركومين باعث بروز تغييرات مورفولوژيكي در سلول ها شدند. نتايج آناليز ژن نشان داد كوركومين و سيس پلاتين باعث كاهش بيان ژن Cdc42 مي شوند. در تمامي موارد اثرات سينرژيك كوركومين و سيس پلاتين مشاهده شد. بنابراين كوركومين مي تواند گزينه خوبي براي استفاده تركيبي با داروهاي شيمي درماني به منظور كاهش دوز مصرفي دارو و كاهش عوارض جانبي آنها باشد.

Lung carcinoma is the second most common type of cancer. Inefficiency of the current treatments and the undesirable side effects of chemotherapy drugs made the know-how of the treatment important. The purpose of this study is to investigate the synergic effect of curcumin and Cisplatin in comparison with the sole application of each treatment on Calu-6 cell line, an epithelial cell line of human lung carcinoma, and the expression of Cdc42 gene. The viability of Calu-6 was examined after 24- or 48-hour treatment with doses of 0.5 to 8 µg/ml of curcumin, 0.1 to 50 µg/ml of cisplatin and combined doses of curcumin and Cisplatin by MTT assay. To measure apoptosis and the expression of Cdc42 gene, flow cytometry and Real-Time PCR were utilized. Decrease of cell viability and induction of cell death were observed in the cells treated with 0.67 µg/ml of curcumin and 1.7 µg/ml of cisplatin (the lowest effective dose) and the combined treatment with the same doses of each drug after 24-hour treatments. The maximum rates of early and late apoptosis were related to treatment with curcumin and the combined treatment. The gene expression analysis results indicated that both Curcumin and Cisplatin decrease the expression of Cdc42 gene, moreover, their co-administration showed synergic effects. Therefore, Curcumin could be an appropriate option for complementary administration with other chemotherapy agents in order to reduce their efficient dose, and to reduce their side effects.