مطالعه تاثير آنتي اكسيداني عصاره هيدورالكلي درمنه (Artemisia incana) بر كيفيت اسپرم منجمد-يخ گشايي شده قوچ مغاني

Antioxidant effect of Artemisia (Artemisia incana) extract on the quality of frozen-thawed semen of Moghani ram

مقدمه: حفظ توان باروري در اسپرم منجمد شده داراي اهميت بسيار بالايي مي ­باشد. مواد و روش ها: به ­منظور بررسي اثر عصاره درمنه ­(Artemisia incana) بر انجماد اسپرم، سطوح مختلف عصاره گياه مذكور ­(0، 2، 4، 6، 8، 10و12 ميلي­ ليتر بر دسي­ ليتر) پس از استخراج به مني رقيق­ شده با محيط حاوي بافر سيترات اضافه گرديد. پس از خنك ­سازي، مني در پايوت ­هاي 0/5 ميلي‌ليتري بسته‌بندي شده و تا زمان ارزيابي خصوصيات كيفي در داخل ازت مايع نگه داري شدند. در اين پژوهش 4 تكرار براي هر تيمار در نظر گرفته شد و در هر تكرار براي هر تيمار 10 پايوت منجمد شد. نتايج: ارزيابي زنده‌‌ماني اسپرم‌ با استفاده از رنگ‌آميزي ائوزين-نيگروزين نشان داد افزودن عصاره درمنه در سطح 4 ميلي­ ليتر در دسي ­ليتر به رقيق‌كننده اسپرم گوسفند تأثير مثبتي در زنده‌ماني اسپرم داشت. هم ­چنين تست محيط هايپواسموتيك به­ منظور بررسي يكپارچگي غشاي پلاسمايي نشان داد كه از لحاظ درصدي تيمار 4 ميلي ليتر در دسي ليتر به رقيق­ كننده داراي بالاترين يكپارچگي غشا بود. بالاترين درصد جنبايي كل مربوط به تيمار حاوي 4 و پايين‌ترين درصد جنبايي مربوط به تيمار 10 ميلي­ ليتر عصاره در رقيق ­كننده بود. بررسي شدت آسيب پراكسيداتيو با اندازه‌گيري مالون‌دي‌آلدهيد نشان داد كم ­ترين ميزان توليد مالون‌دي‌آلدهيد مربوط به تيمار داراي 12 ميلي ­گرم عصاره بر دسي ­ليتر رقيق­ كننده بود كه به­ طور معني‌داري نسبت به ساير گروه ­هاي آزمايشي پايين ­تر بود. نتيجه گيري و بحث: با توجه به نتايج آزمايش حاضر به نظر مي ­رسد استفاده از عصاره آبي درمنه در سطح 4 ميلي‌ليتر در دسي ­ليتر رقيق­ كننده داراي اثرات مثبت بر فرآسنجه‌هاي كيفي اسپرم پس از انجماد دارد.

Maintaining fertility in frozen sperm is very important. To investigate the effect of Artemisia (Artemisia incana) extract on sperm cryopservability of Moghani ram spermatozoa, different levels of the plant extract (0, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 ml per deciliter) were added after extraction to diluted semen with an extender containing citrate buffer. After chilling, the semen was packaged in 0.5 ml straws and stored inside the liquid nitrogen until the evaluation of qualitative properties. This experiment was designed with 4 replications ­(with 10 straws in each replicate) per experimental group. Evaluation of sperm viability using eosin-nigrosine staining showed that adding 4 ml of Artemisia extract per deciliter to sheep sperm diluent had a positive effect on sperm viability. Similarly, the HOST test (hypoosmotic swelling test) to examine the integrity of the plasma membrane showed that the treatment had the highest membrane integrity (P<0.05). The highest and lowest Total Motility (TM) was observed in experimental groups 4 and 10 ml of extract in diluted semen, respectively (P<0.05). Examination of peroxidative damage by measuring malondialdehyde showed the lowest amount of malondialdehyde production was seen in the treatment with 12 mg of extract per deciliter diluent that was significantly different from other experimental groups (P<0.05). According to the results of the present experiment, it seems that the use of 4 ml Artemisia extract per deciliter of the diluent has positive effects on the quality of sperm after freezing.