ارتباط چند شكلي اگزون 6 ژن BMPR1B با صفت چند قلوزايي در گوسفندان سنجابي ، قزل و ماكويي با استفاده از تكنيك PCR-SSCP

Association of the Polymorphism BMPR1B gene exon 6 with litter size in Sanjabi, Ghezel and Makui sheep by PCR –SSCP technique

ژن گيرنده ­ي پروتئين مورفوژنتيك استخوان BMPR1B)) يكي از ژن­هاي بزرگ اثر است كه نقش مهمي در افزايش ميزان تخمك ­گذاري در گوسفندان دارد. در مطالعه­ ي حاضر از تعداد 100 راس گوسفند نژاد سنجابي ايستگاه پرورش مهرگان استان كرمانشاه، 60 راس گوسفند نژاد قزل و 40 رأس از گوسفندان نژاد ماكويي ايستگاه پرورش گوسفند دانشگاه اروميه خون­گيري به عمل آمد. استخراج DNA از نمونه ­هاي خون به روش كيت استخراج شركت سيناژن و واكنش زنجيره­اي پليمراز (PCR) جهت تكثير يك قطعه 190جفت بازي از اگزون 6 ژن BMPR1B با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي انجام گرفت. چند شكلي فضايي تك­رشته­اي SSCP محصولات PCR با استفاده از ژل پلي­آكريل­آميد و رنگ­آميزي نيترات نقره به دست آمد. نتايج نشان داد كه ناحيه­ي مورد بررسي از ژن BMPR1B در دو نژاد سنجابي و قزل داراي چندشكلي بوده و در نژاد ماكويي بدون هيچ جهشي مشاهده گرديد. در نمونه­هاي مورد مطالعه سه الگوي باندي مختلف 1، 2 و3 براي نژاد سنجابي به ترتيب با فرواني 27/49، 23/36 و 49/14 و سه الگوي باندي مختلف 1، 2 و 3 براي نژاد قزل به ترتيب با فراواني 55/55، 33/33 و 11/11مشاهده شد. ارتباط الگوهاي مشاهده شده در نژاد سنجابي و قزل روي صفت چندقلوزايي معني­ دار بود. نتايج نشان داد كه اين چندشكلي در گوسفند نژاد سنجابي و قزل مي­تواند به ‌عنوان يك نشانگر براي صفت دوقلوزايي مورد استفاده قرار گيرد.

The bone morphogenetic protein receptor gene (BMPR1B) is one of the major affect genes that plays an important role in increasing the rate of ovulation in sheep. In this study, Blood samples were collected from 100 sheep of Sanjabi in Mehregan breeding station in Kermanshah province, 60 sheep Ghezel and 40 Makui breeding station of Urmia University. DNA was extracted, using extraction kit of Sinnagen co. After DNA extraction specific primers used for amplification of 190 bp fragment of Exon 6 BMPR1B gene. Then single strand conformation polymorphism (SSCP) of PCR products was performed and genotypic patterns were obtained using acrylamid gel and silver staining. The results showed that the strips appearing on the acrylamide gel in two Sanjabi and Ghezel breeds were polymorphic and in the Makavi breed in a shape. Three different banding patterns in samples 1, 2 and 3 for Sanjabi breed 49.27% ,36.23% and 14.49% respectively, Three different band pattern The frequency were 1, 2 and 3 for Ghezel breed 55.55% ,33.33%. and 11.11% respectively, The association of observed patterns on the multiplicity trait was significant in Sanjabi and Ghezel breed (P <0.05).The results showed that this polymorphism in Sanjabi and Ghezel sheep could be used as a marker for twin traits.