مقايسه اثر داروي توپوتكان بر فعاليت آنزيم نيتريك ‌اكسايد سنتاز در رده سلولي توموري (Hela) و رده سلولي نرمال (Hek)

Comparison of the effect of topotecan on the activity of nitric oxide synthase in the tumor cell line Hela and normal Hek cell line

هدف: منظور از انجام اين پژوهش بررسي اثر داروي توپوتكان بر ميزان فعاليت آنزيم نيتريك ‌اكسايد سنتاز سلول‌هاي دهانه رحم (Hela) در مقايسه با سلول‌هاي نرمال (Hek) بود. مواد و روش ها: بدين منظور سلول‌هاي سرطاني دهانه رحم (Hela) و سلول نرمالHek در گروه‌هاي كنترل و تيمار دسته‌بندي شدند. گروه‌ها با غلظت‌هاي 7/8 ،15/6، 31/25 ، 62/5 ، 125و250 ميكرو گرم در هر ميلي‌ليتر از داروي توپوتكان در مدت زمان 24، 48، 72 ساعت تحت تيمار قرار گرفتند. سپس داده‌هاي حاصل از آناليز سوپ رويي پليت‌ها براي بررسي ميزان سلول‌هاي زنده با استفاده از روش MTT، واكنش گريس و هم‌چنين روش Real Time PCR بررسي و داده‌ها با استفاده از روش آماري واريانس يك‌طرفه بين گروه‌ها مقايسه شد.نتايج: نتايج حاصل از تست MTT نشان‌دهنده اين مورد است كه داروي توپوتكان (در غلظت‌هاي متفاوت از دارو) باعث مهار رشد و تقسيم سلول‌هاي سرطاني دهانه رحم مي‌شود (0/05≤p)، هم‌چنين بيان ژن نيتريك ‌اكسايد در سلول‌هاي تيمار شده با غلظت‌ 250 ماكروگرم در 1 ميلي‌ليتر توپوتكان نسبت به سلول‌هاي بدون تيمار 1.2 برابر افزايش يافته است.نتيجه گيري: بين اثرات سايتوتوكسيك توپوتكان و ميزان نيتريك ‌اكسايد رابطه مستقيمي وجود دارد و با افزايش نيتريك ‌اكسايد در سلول‌هاي سرطاني مرگ اين سلول‌ها افزايش مي‌يابد.

Aim: The aim of this study was the effect of topotecan on the activity of nitric oxide synthase in the tumor cell line Hela in comparison with the normal Hek cell line. Material and Methods: For this purpose, Hela and Hek cells were randomly divided into the control groups and treatment groups exposed to 7.8, 15.6,31.25, 62.5,125, and 250 μg/ml of topotecan for 24,48,72 hr. Then, the data analysis of plate supernatant was evaluated the number of live cells using the MTT method, grease reaction as well as Real-Time PCR method and the data were compared using the one-way ANOVA statistical method between groups. Results: The viability of Hela cells exposed to 250, 125, and 61.5 μg/ml of topotecan significantly decreased in comparison to the control group in 24, 48, and 72 h (p≤0.05). Also, the level of nitric oxide in Hela cells that were exposed to 250 μg/ml drug increased ½ times in comparison to the control group. Conclusion: Topotecan has an inhibitory effect on cervical cancer cells. Also, topotecan increased the level of nitric oxide in Hela cells and this amount of nitric oxide kills the cells in cervical cancer cells.