توليد آنزيم تاناز توسط شبه گونه‌هاي تريكودرما ( .Trichoderma spp) با استفاده از تانن به عنوان تنها منبع كربن و انرژي

Tannase Production by Trichoderma Species in Tannin Containing Medium as a Sole Carbon and Energy Source

هدف از انجام اين آزمايش بررسي توليد آنزيم تاناز توسط شبه گونه‌هاي قارچ تريكودرما (شامل ويريده، رسئي، هارزيانوم و لانگي براكياتوم) در محيط‌ كشت تخميري حاوي اسيد تانيك به عنوان تنها منبع كربن و انرژي بود. خصوصيات موفولوژيكي گونه‌ها در محيط كشت حاوي مالت، مخمر و گلوكز (MYG) بررسي شد. براي توليد آنزيم، اسپور قارچها در محيط كشت تخميري تريكودرما (TFM) حاوي اسيد تانيك (1 درصد) كشت شد. نتايج نشان داد كه كلنيهاي تريكودرما ابتدا صاف بود و سپس به تدريج دستجات پشمي سفيد رنگ در آنها ظاهر و به مرور سبز رنگ شد. بزرگترين اسپور مربوط به تريكودرما لانگي‌براكياتوم و كوچكترين مربوط به تريكودرما رسئي بود. بيشترين و كمترين تعداد اسپور در محيط كشت MYG به ترتيب مربوط به تريكودرما هارزيانوم (106×48/5) و ويريده (106×12/2) بود. بيشترين رشد ريسه‌ در تريكودرما لانگي‌براكياتوم و كمترين در رسئي مشاهده شد (به ترتيب 25/1 و 45/0 سانتي‌متر در روز). پروتئين توليدي توسط تريكودرما رسئي كمتر از سه گونه ديگر بود (05/0>P). فعاليت ويژه آنزيمي در شبه گونه‌هاي لانگي‌براكياتوم بيشتر از ويريده (به ترتيب 33/1 و 68/0واحد به ازاي ميلي‌گرم پروتئين) بود (05/0>P). تفاوت معني‌داري در فعاليت آنزيمي تاناز توليدي در شبه گونه‌هاي مورد مطالعه وجود نداشت. وزن مولكولي پروتئين توليدي در سوپرناتانت محيط كشت TFM توليدي 131 كيلودالتون با دو زير واحد به وزن تقريبي 62 و 69 كيلودالتون بود. نتايج نشان داد كه گونه‌هاي تريكودرما با استفاده از اسيد تانيك به عنوان تنها منبع انرژي در محيط كشت تخميري توانايي رشد و توليد تاناز را دارند.

This study investigated tannase production by Trichoderma viride (Tv), Trichoderma harzianum (Th), Trichoderma longibrachiatum (Tl) and Trichoderma ressei (Tr) in the medium containing tannin as the sole carbon and energy source. Trichoderma colonies were flat, and then gradually showed a white unsmooth appearance and finally turned to green. The largest and smallest spores were belonged to Tl and Tr, respectively. The highest and lowest spore numbers in MYG were belonged Th (5.48 × 106) and Tv (12.26 × 106), respectively. The largest growth rate of mycelium was observed in Tl and the lowest in Tr (1.25 and 0.45 cm/d, respectively). The level of protein produced in TFM by Tr was lower (P<0.05) than the other species. The tannase production and its specific activity were similar across species. The enzyme-specific activity in Tl was significantly more (P<0.05) than Tv (1.33 and 0.68 ul/mg protein). The molecular weight of the produced tannase was 131 kDa with two subunits weighing approximately 62 and 69 kDa.