بررسي اثر سميت عصاره متانولي Artemisia absinthium بر روي دودمان سلولي A2780 (سرطان تخمدان انساني) و تغييرات سطح بيان ژن‌هاي آپوپتوزي

CYTOTOXIC EFFECTS OF ARTEMISIA ABSINTHIUM EXTRACT ON A2780 CELL LINE (OVARIAN CANCER) an‎d ALTERATION OF APOPTOTIC GENES EXPRESSION LEVELS

پيش‌زمينه و هدف: سرطان تخمدان سومين سرطان شايع در ميان زنان هست. گياهان جنس Artemisia يكي از پركاربردترين گياهان دارويي مي­باشند؛ Artemisia absinthium از گونه­ هاي مهم اين جنس است. مطالعه حاضر باهدف ارزيابي اثر سميت سلولي و توانايي القاي آپوپتوز عصاره متانولي A. absinthium در دودمان سلولي A2780 (سرطان تخمدان انساني) انجام گرديد. مواد و روش‌ كار: در اين پژوهش تجربي-آزمايشگاهي پس از تهيه عصاره متانولي A. absinthium براي بررسي اثرات سيتوتوكسيك عصاره A. absinthium بر روي تكثير سلو­­­­ل­ هاي سرطاني رده A2780 از آزمون MTT استفاده شد؛ براي بررسي توانايي القاي آپوپتوز در سلول­ هاي تحت تيمار با عصاره A. absinthium از روش ­هاي رنگ‌آميزي DAPI و آناليز فلوسايتومري استفاده شد؛ تغييرات در ميزان بيان ژن­ هاي آپوپتوزي "BAX, Caspase 3,9, p53" با فن Real-time PCR بررسي شد. داده­ هاي كمي حاصل توسط آزمون آماري "ANOVA" در سطح معني‌داري "p< 0.05" تحليل گرديد. يافته‌ها: نتايج حاصل از آزمون MTT نشان داد كه عصاره متانولي A. absinthium، تكثير سلول ­­هاي سرطاني A2780 را به‌صورت وابسته به غلظت (***0/001>p) مهار مي­­ كند، مشاهدات مورفولوژيك حاصل از روش DAPI و نتايج آناليز فلوسايتومتري نشان‌دهنده افزايش درصد سلول ­هاي آپوپتوتيك در گروه­ هاي تيماري بود. بررسي نتايج Real-time PCR نشان‌دهنده افزايش بيان ژن­هاي آپوپتوزي "BAX, Caspase 3,9, p53" در سطح معني‌داري (**0/01>p) و (***0/001>p) در گروه ­هاي تيماري بود.

Background & Aims: Ovarian cancer is the third most common cancer in women. Artemisia is one of the most commonly used medicinal plants, and Artemisia absinthium is one of the important species of this genus. The aim of this study was to evaluate the effect of cytotoxicity and the ability to induce apoptosis methanolic extract of A. absinthium in A2780 cell line (human ovarian cancer). Materials & Methods: In this experimental study, methanolic extract of A. absinthium was prepared. MTT assay was used to evaluate the cytotoxic effects of A. absinthium extract on A2780 cancer cell proliferation and DAPI staining and flow cytometry analysis were used to evaluate the ability to induce apoptosis in treated cells with A. absinthium extract. Changes in "BAX, Caspase 3,9, p53" genes expression were evaluated by Real-time PCR. Quantitative data were analyzed by one-way ANOVA at a significant level of p<0.05. Results: The MTT assay results showed that methanolic extract of A. absinthium, inhibits proliferation of ovarian cancer A2780 cells in a concentration-dependent manner (p<0.001***). Morphological observation with DAPI staining and flow cytometry analysis results showed an increased percentage of apoptotic cells. The real-time PCR results showed an increase in the expression of apoptotic genes "BAX, Caspase 3,9, p53" in treatment groups p <0.01**; p<0.001***. Conclusion: The results of this study showed that the methanolic extract of A. absinthium inhibits the proliferation of A2780 cancer cells and induces apoptosis in these cells.