مهار فاكتور Wnt3a موجب كاهش تمايز سلول‌هاي بنيادي قلبي رت به سلول‌هاي آندوتليال مي‌شود

INHIBITION OF WNT3A DIMINISHED ANGIOGENIC DIFFERENTIATION CAPACITY OF RAT CARDIAC PROGENITOR CELLS

پيش‌زمينه و هدف: سكته قلبي، يكي از عمده ­ترين علل مرگ‌ومير در كشورهاي صنعتي و رو به رشد است. توانايي محدود ترميمي سلول­ هاي قلبي پس از حمله ايسكمي باعث آسيب گسترده شده و فرد را مستعد نارسايي قلبي مي­ كند. در حال حاضر، دارودرماني يكي از راه‌هاي اصلي براي جلوگيري از گسترش ضايعه و حفظ يكپارچگي بافت ميوكارديوم پس از حمله ايسكمي است. امروزه استفاده از سلول­ هاي بنيادي جهت بازيابي ساختاري و حفظ عملكرد قلبي در بيماران اميدهاي تازه‌اي را پيش روي متخصصين بالين قرار داده است. اين سلول‌ها با ترشح انواع فاكتورها و تمايز به رده‌هاي سلولي مختلف ازجمله سلول­ هاي عروقي باعث تسريع روند ترميم مي ­شوند. در اين مطالعه نقش مهار فاكتور Wnt3a بر روند تمايزي سلول‌هاي بنيادي قلبي رت (H9C2) به سمت سلول‌هاي آندوتليال موردبررسي قرار گرفته است. مواد و روش كار: در اين پژوهش تجربي- آزمايشگاهي، سلول­ هاي كارديوميوبلاست رت (H9C2) در محيط كشت DMEM/HG تكثير و با 10 ميكرو­مولار LGK-974 (مهاركننده Wnt3a) به مدت 48 ساعت انكوبه شدند. بقاء سلولي با استفاده از روش MTT بررسي شد.­ توان تمايزي به سلول­ هاي آندوتليال، از طريق اندازه­ گيري بيان ژن­ ها و سطوح پروتئيني فاكتورهاي VE-cadherin و vWF با استفاده از روش اندازه­ گيري بيان ژن و وسترن بلات بررسي شد. يافته ­ها: مهار Wnt3a در سلول ­هاي H9C2 به‌طور معني‌داري بقاء اين سلول ­ها را بعد از 48 ساعت در مقايسه با گروه كنترل كاهش داد (p<0.05). بر اساس نتايج به‌دست‌آمده، ميزان بيان ژني و سطوح پروتئيني فاكتورهاي VE-cadherin و vWF در گروه تيمار شده با LGK-974 به‌طور معني‌داري كاهش يافت (p<0.05). بحث و نتيجه ­گيري: مهار فاكتور Wnt3a مي­ تواند توان رگ­زايي سلول­ هاي پيش­ساز قلبي رت را كاهش ­دهد.

Background & Aims: Myocardial infarction is a leading cause of human mortality in industrialized and developing societies. Limited restorative ability of of cardiomyocytes after ischemic changes can causes extensive damage lead to prominent chronic heart failure. At present, the application of certain drugs is touted as one of the main available approaches to inhibit the spread of the lesion and to maintain the integrity of the myocardial tissue after infarction. Today, the transplantation of stem cells to restore structure and maintain heart function has opened new hopes for clinicians in human medicine. These cells accelerate the healing process by secreting a variety of factors and differentiation into varient cell lines, including vascular cells. Here, we investigated the inhibitory role of Wnt3a factor on the process of differentiation of rat cardiomyoblast (H9C2) to endothelial cells. Materials & Methods: In this experimental study, rat cardiomyoblast (H9C2) were expanded in DMEM/HG and exposed to 10 μM LGK-974 (a Wnt3a inhibitor) for 48 hours. The viability of cells was determined using MTT method. The ability to differentiation into endothelial cells was assessed by measuring expression and protein levels of VE-Cadherin and vWF using real-time PCR and western blotting. Results: The inhibition of Wnt3a in H9C2 cells could significantly reduce cell survival rate after 48 hours compared to the control cells (p<0.05). Based on data, expression and protein levels of VECadherin and vWF were significantly diminished in group incubated with LGK-974 Conclusion: The inhibition of Wnt3a can suppress the angiogenic potential of rat cardio myoblasts