بررسي اثر كشندگي سيپروفلوكسازين و محلول رويي جدا شده از استافيلوكوكوس اورئوس متأثر از سيپروفلوكسازين بر روي سويه‌هاي استافيلوكوك اورئوس مقاوم به متي‌سيلين جدا شده از نمونه‌هاي كلينيكي

Survey of the Lethal Effect of Ciprofloxacin and Supernatant Isolated from Staphylococcus Aureus under the Stress of Ciprofloxacin on Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus Strains Isolated from Clinical Specimens

زمينه و هدف: استافيلوكوك‌هاي اورئوس جزو مهمترين عوامل عفونت‌هاي بيمارستاني به‌شمار رفته و مي‌توانند عفونت‌هاي سطحي و يا عمقي ايجاد نمايند. در اين بين سويه‌هاي مقاوم به متي‌سيلين (Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus (MRSAاز اهميت ويژه‌اي برخوردار هستند. در سال‌هاي اخير مقاومت باكتري‌ها به آنتي‌بيوتيك‌هاي موجود يكي از نگراني‌هاي اصلي مي‌باشد. بسياري از باكتري‌ها امروزه به حداقل يكي از عوامل آنتي‌بيوتيكي و در بيشتر موارد به چندين آنتي‌بيوتيك از گروه‌هاي مختلف مقاومت نشان مي‌دهند. هدف از مطالعه‌ي حاضر، اثر كشندگي محلول رويي جدا شده از استافيلوكوك اورئوس متاثر از سيپروفلوكسازين بر روي سويه‌هاي باليني MRSA بوده است. روش بررسي: در تحقيق حاضر، تعداد 83 سويه استافيلوكوكوس اورئوس كه بر روي محيط BHI براث كشت داده شده بود از بيمارستان‌هاي تابع دانشگاه علوم پزشكي همدان جمع‌آوري و به آزمايشگاه محل تحقيق ارسال شد. سويه‌هاي MRSA باليني از نظر فنوتيپ و ژنوتيپ تاييدشده و سپس (MIC) Minimum Inhibitory Concentration و (Minimum Bactericidal Concentration (MBC تعدادي از سويه‌هاي باليني MRSA را به‌طور جداگانه در مجاورت آنتي‌بيوتيك سيپروفلوكسازين و همچنين محلول رويي (supernatant) كه از محيط كشت مايع استافيلوكوكوس اورئوس زير فشار سيپروفلوكسازين استخراج شده بود، به‌دست آمد. يافته‌ها: تست‌هاي تشخيصي استافيلوكوكوس اورئوس از جمله رنگ‌آميزي گرم بر روي كلني‌ها و انجام تست‌هاي كاتالاز و كوآگولاز لوله‌اي انجام گرفت و مشخص شد كه تمامي سويه‌ها استافيلوكوكوس اورئوس بودند. در مرحله‌ي بعدي با استفاده از PCR و پرايمر mecA هر 83 سويه داراي ژن mecA بوده و از نظر ژنوتيپي نيز وجود سويه‌هاي MRSA تاييد گرديد. ميزان متوسط MIC سيپروفلوكسازين و محلول رويي براي سويه‌هاي مختلف MRSA به‌ترتيب mg/ml 0/032 و ml/ml 0/02 و ميزان متوسط MBC سيپروفلوكسازين و محلول رويي براي سويه‌هاي مختلف MRSA به‌ترتيب mg/ml 0/064 و ml/ml 0/04 به‌دست آمد. نتيجه‌گيري: مقادير MIC و MBC در مورد سويه‌هاي MRSA در مجاورت سيپروفلوكسازين و در مجاورت محلول رويي از نظر عددي تقريبا مشابه بودند كه اين نشان‌دهنده‌ي تاثير كشندگي ماده پروتئيني ترشح شده از استافيلوكوك‌هاي كشت داده شده در مجاورت مقادير بسيار كم سيپروفلوكسازين بر روي خود باكتري‌ها مي‌باشد.

Background and Aim: Staphylococcus aureus is gram-positive coccus that is one of the most important causes of nosocomial infections and cause cutaneous or subcutaneous infections. Among these bacteria Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) are the most important. The aim of the present study was to investigate the lethal effect of a substance isolated from Staphylococcus aureus under the influence of ciprofloxacin on clinical strains of MRSA. Materials and Methods: In the present study, 83 strains of Staphylococcus aureus isolated from hospitals affiliated to Hamadan University of Medical Sciences and were referred to the research laboratory in faculty of Allied Medical Sciences. Strains of Staphylococcus aureus were identified genotyping and phenotyping by PCR test to prove the presence of mecA gene. Minimums Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were examined on number of MRSA in the presence of ciprofloxacin antibiotic as well as supernatant extracted from Staphylococcus aureus fluid culture medium under ciprofloxacin stress. Results: Diagnostic tests of Staphylococcus aureus, including gram staining, catalase and coagulase tests were performed and all strains were Staphylococcus aureus. In the next step, the strains were genetically tested for confirming methicillin-resistant Staphylococcus aureus, by PCR test and present of mecA gene. All 83 samples had mecA genes and were MRSA. The mean MIC of ciprofloxacin and supernatant for different strains of MRSA were 0.032 mg/ml and 0.02 ml/ml, respectively, and the mean levels of MBC ciprofloxacin and supernatants for different strains of MRSA were 0.064 mg/ml and 0.04 ml/ml, respectively. Conclusion: The effect of ciprofloxacin and supernatant on the death of stressed bacteria has been confirmed so that after bacterial stress by the antibiotic ciprofloxacin expression of genes related to programmed death was seen in a number of MRSA samples. The MIC and MBC values for MRSA strains in the presence of ciprofloxacin and the supernatant showed similar results, indicating the lethal effect of the protein secreted by cultured staphylococci in the presence of low amounts of ciprofloxacin on the bacteria themselves.