افزايش زيست‌كاني‌سازي سلول‌هاي بنيادي و جذب پروتئين‌هاي ماتريكس خارج سلولي روي سطح داربست‌ زيست‌فعال تقويت‌شده با نانولوله‌هاي كربني چندديواره كربوكسيل‌دار

Enhanced Biomineralization of Stem Cells and Adsorption of Extracellular Matrix Proteins on Bioactive Scaffold Reinforced with Carboxylated Multi-Walled Carbon Nanotubes

مهندسي بافت، با ارائه داربست‌هايي با قابليت تحريك استخوان‌سازي، بستري مناسب را براي بازسازي و ترميم بافت‌هاي استخواني آسيب‌ديده فراهم مي‌كند. در اين مطالعه، داربست‌هاي پلي‌كاپرولاكتون (داربست A)، پلي‌كاپرولاكتون/كراتين (داربست B) و پلي‌كاپرولاكتون/كراتين تقويت‌شده با نانولوله‌هاي كربني چندديواره كربوكسيل‌دار (COOH-MWCNT) (داربست C)، به روش الكتروريسي، ساخته و تمايز استئوژنيك (Osteogenic) سريع سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي و زيست‌كاني‌سازي در داربست‌ها بررسي شد. زيست‌فعالي داربست‌ها، با طيف‌سنجي پراش انرژي پرتو ايكس (EDS) و پلاسماي جفت‌ شده القايي-طيف‌سنجي نشر نوري (ICP-OES) و جذب پروتئين‌هاي ماتريكس خارج سلولي، با كيت سنجش پروتئين BCA ارزيابي شد. همچنين، تأثير COOH-MWCNT بر رسوب كلسيم در روي سطح داربست‌ها در دو مقطع زماني 7 و 14 روز، بررسي شد. شكل‌گيري لايه هيدروكسي آپاتيت روي سطح داربست C، قابليت استخوان‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌زايي و زيست‌فعالي عالي داربست را نشان ‌داد. ميزان جذب پروتئين روي سطح داربست‌هاي B و C، به‌ترتيب، 32 و 43 ميكروگرم بر ميلي‌متر مكعب اندازه‌‌گيري شد كه نشانه رشد و تكثيربيشتر سلول‌هاي مزانشيمي در داربست C نسبت به داربست B بود. همچنين، رسوب بالا كلسيم روي سطح داربست C ، تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي (Mesenchymal stem cells differentiate) به سلول هاي استخواني را در داربست نشان داد. نتايج اين پژوهش نشان ‌داد كه داربست پلي‌كاپرولاكتون/كراتين تقويت‌شده با COOH-MWCNT، داراي زيست‌فعالي و آب‌دوستي عالي و تمايز استئوژنيك سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي بوده و مي‌تواند گزينه مناسبي براي كاربرد در مهندسي بافت استخوان باشد.

Tissue engineering creates a suitable substrate for the regeneration and repair of damaged bone tissue by providing scaffolds with the ability to stimulate bone formation. In this study, polycaprolactone (PCL) scaffold (scaffold A), PCL/keratin (Kr) scaffold (scaffold B), and PCL/Kr scaffold reinforced with carboxylated multi-walled carbon nanotubes (MWCNT-COOH) (scaffold C) were fabricated by electrospinning method and rapid osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells and biomineralization on the scaffolds surface were evaluated. The bioactivity of scaffolds was investigated using energy dispersive x-ray spectroscopy (EDS) and inductively coupled plasma-optical emission spectroscopy (ICP-OES) and extracellular matrix proteins adsorption on the surface of scaffolds were also evaluated by BCA assay kit. Moreover, the effect of MWCNT-COOH on calcium deposition in the scaffolds were studied on days 7 and 14 of culture. The formation of hydroxyapatite layer on the scaffold C indicated the excellent osteoproductivity and bioactivity of scaffold. The amount of protein adsorption on the surface of scaffolds B and C was measured to be 32 μg/mm3 and 43 μg/mm3, respectively, which showed an increase in mesenchymal stem cells proliferation on the surface of scaffold C compared to the scaffold B. Also, high calcium deposition on the surface of scaffold C indicated mesenchymal stem cells differentiate into osteoblasts on the surface of scaffold. Therefore, the results of this study demonstrated that the PCL/Kr scaffold reinforced with MWCNT-COOH with excellent bioactivity, high protein adsorption, and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells can be a suitable candidate for bone tissue engineering applications.