بررسي تغييرات بيان lncRNA UCA1 و ژن هدف AKT تنظي مكننده مسير سيگنالي PI3K / AKT در رده سلولي لوسمي حاد لنفوبلاستيك Jurkat E6.1 تحت تيمار با كمپلك سهاي تيوسمي كاربازون

Analysis of Thiosemi Carbazon Complexes Effects on UCA1 lncRNA and AKT Target, Gene Expression Alternations, Regulating PI3K / AKT Signaling Pathway in Jurkat E6.1 Acute Lympholastic Leukemia Cell Line

زمينه و هدف لوسمي معمولاً از مغز استخوان شروع شده و به توليد تعداد زيادي سلول هاي سفيد غيرطبيعي خون منجر م يشود. هدف از اين مطالعه بررسي تغ ييرات بيان UCA1 و ژن هدف AKT تنظي مكننده مسير سيگنالي PI3K / AKT در رده سلولي لوسمي حاد لنفوبلاستيك Jurkat E6.1 تحت تيمار با كمپلكس هاي تيوسمي كاربازون (نيكل) است. روش بررسي داروي نيكل و 6MP در غلظ تهاي متفاوت 5/ 0- 1- 2- 5 ماكرومولار و 1- 5- 10 - 25 ماكرومولار تهيه شد. سلول هاي سرطاني Jurkat E6.1 پس از پاساژ سلولي در زما نهاي مختلف ( 24 - 48 - 72 ساعت) تحت تيمار با دارو قرار گرفتند. در ادامه، استخراج RNA و سنتز cDNA انجام شد و بيان UCA1 و ژن AKT توسط Real Time PCR ارزيابي شد. نتايج ب هدس تآمده توسط نر مافزار بررسي بيان نسبي REST آناليز آماري شدند. يافته ها UCA1 در زمان 24 ساعت تيمار با 6mp در غلظت هاي 1 و 5 و 10 و 25 ماكرومولار كاهش بيان معناداري ( 001 / P<0 ) نشان داد. در نيكل در غلظت هاي (2 و 5) ماكرومولار زمان 72 ساعت كاهش بيان معنادار مشاهده شد و در ژن AKT در تيمار با 6mp در 24 ساعت در غلظت هاي 5 و 10 و 25 ماكرومولار و تمام غلظت هاي 1 و 5 و 10 و 25 ماكرومولار زمان 72 ساعت (001 / P<0) كاهش معنادار مشاهده شد. در نيكل نيز در غلظت هاي 5/ 0 و 1 و 2 و 5 ماكرومولار زمان 24 ساعت كاهش بيان مشاهده شد كه اين كاهش در غلظت 5/ 0 ماكرومولار از نظر آماري معنادار نيست. در غلظت هاي 2 و 5 ماكرومولار زما نهاي 48 و 72 ساعت كاهش بيان معنادار (P<0/001) مشاهده شد. نتيجه گيري تغييرات بيان UCA1 و AKT پس از تيمار با 6mp و نيكل به زمان و غلظت دارو وابسته است. UCA1 در تيمار با 6MP در غلظت 25 ماكرومولار زمان 24 ساعت و در تيمار با نيكل در غلظت μM5 زمان 72 ساعت و AKT در تيمار با 6mp در غلظت 25 ماكرومولار زمان 72 ساعت و در تيمار با نيكل در غلظت 5 ماكرومولار زمان 24 ساعت بالاترين تأثير بر سلول با توجه به بيان ژن داشته است.

Background and Objectives Leukemia usually begins in the bone marrow and leads to the production of a large number of abnormal white blood cells.The goal of this study was to investigate changes on UCA1 lncRNA and AKT target, gene expression alternations, regulating PI3K / AKT signaling pathway in Jurkat E6.1 Acute Lympholastic Leukemia cell line under treatment with thiosemicarbazone complexes (nickel). Subjects and Methods First, thiosemicarbazones complex Ni and 6MP was provided in different concentrations (0.5,1,2,5 μM) and (1,5,10,25 μM) and the jurkat E.6.1 Cancer cells were treated with mentioned doses at (24-48-72 hours) after cell passage. Next RNA extraction and cDNA synthesis were performed and the expression of UCA1 and AKT gene were appraised by Real Time PCR. Finally, the results were analyzed by Rest Software. Results UCA1 showed a significant decrease during 24 hours of treatment with 6mp at concentrations (1,5,10 and 25 μM) (P<0.001). In nickel,a significant decrease at 72 hours was observed at concentrations (2 and 5 μM). In the AKT in treatment with 6mp at 24 hours At concentrations (5,10 and 25 μM) an‎d all concentrations (1,5,10 and 25 μM) at 72 hours showed a significant decrease (P<0.001). In nickel at concentrations (0.5,1,2 and 5 μM) at 24 hours Decreased expression was observed, This decrease is not statistically significant at a concentration of 0.5μM.at concentrations (2 and 5 μM) Significant reductions at 48 and 72 hours were observed (P<0.001). Conclusion UCA1 and AKT expression changes after treatment with 6mp and nickel depend on drug timing and concentration.UCA1 in 6MP treatment at 25μM and 24 hours,in treatment with nickel at 5μM and 72 hours , AKT in 6mp treatment at 25μM and 72 hours , In treatment with nickel at 5μM and 24hours,It had the highest effect on the cell due to gene expression.