بررسي اثر سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك بر بيان ژن Sirtuin-3در تخمك موش‌‌هاي نژاد NMRI

Investigation of the Effect of Polycystic Ovary Syndrome on the Expression of the Sirtuin-3 Gene in the Ovum of the NMRI Mice

افزايش توليد راديكال‌‌هاي آزاد در تخمك‌‌ها به كاهش كيفيت باروري آن‌ها منجر مي‌‌شود. مطالعات نشان داده است كه در زنان مبتلا به سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك، سطح راديكال‌‌هاي آزاد بافتي و سرمي افزايش مي‌‌يابد. Sirtuin-3در ميتوكندري قرار دارد و نقش مهمي در مهار راديكال‌‌هاي آزاد ايفا مي‌كند؛ بنابراين، هدف از مطالعۀ حاضر بررسي بيان ژن Sirtuin-3 در تخمك‌‌ موش‌‌هاي مبتلا به سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك بود. مواد و روش ها: سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك توسط تزريق استراديول والرات (40 ميلي‌‌گرم بر كيلوگرم) در 6 موش‌‌ نژاد NMRI با سن 6 هفته و وزن 5±‌‌25 گرم ايجاد گرديد و 6 موش نيز به‌عنوان گروه كنترل در نظر گرفته شد. به دنبال القاي بيماري، بافت تخمدان توسط روش هيستوتكنيك بررسي گرديد و سطح سرمي هورمون‌‌هاي جنسي با استفاده از كيت مخصوص الايزا تعيين شد. تخمك‌‌ها از تخمدان موش‌‌ها جمع‌‌آوري گرديد و RNA آن‌ها توسط كيت مخصوص استخراج و به cDNA تبديل شد و سپس Real Time PCR براي سنجش بيان ژن Sirtuin-3 صورت گرفت و ژن Gapdh به‌عنوان كنترل داخلي در نظر گرفته شد. يافته‌ها: در تخمدان موش‌‌هاي مبتلا به سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك، كيست‌‌هاي هيداتيد تشكيل گرديد و سطح هورمون FSH كاهش و سطح هورمون‌‌هاي LH و تستوسترون در مقايسه با گروه كنترل افزايش يافت (P<0.001). بيان ژن Sirtuin-3 در تخمك‌‌هاي جمع‌‌آوري‌شده از موش‌‌هاي بيمار نسبت به موش‌‌هاي سالم، به ميزان 18/0 كاهش يافت (P<0.05). بحث و نتيجه‌گيري: نتيجۀ تحقيق حاضر نشان داد كه بيان ژن Sirtuin-3 در تخمك موش‌‌هاي مبتلا به سندرم تخمدان پلي‌كيستيك كاهش مي‌‌يابد. بيان نادرست ژن Sirtuin-3 در تخمك مي‌‌تواند به‌‌عنوان يكي از علل كاهش كيفيت باروري تخمك در بيماران مبتلا به سندرم تخمدان پلي‌‌كيستيك مطرح باشد.

Increasing levels of free radicals in the ova reduce the quality of their fertilization. Investigations have revealed the elevated production of tissue and serum-free radicals in women with polycystic ovary syndrome. Sirtuin-3 is located in mitochondria and plays an important role in the deactivation of free radicals. This study aimed to investigate the expression of the Sirtuin-3 gene in the ova of polycystic ovary syndrome affected mice. Material & Methods: Polycystic ovary syndrome was induced by the injection of estradiol valerate (40 mg/kg) in six NMRI mice (age: six weeks old; weight: 25±5); moreover, six mice were selected as a control group. Following the induction, the structure of the ovaries was examined using the histotechnique, and the serum levels of sex hormones were determined using ELISA. The ova were collected from the ovaries, and their RNA was extracted by a special kit and converted to cDNA. Real-Time PCR was performed to analyze the expression of Sirtuin-3, and the Gapdh gene was selected as an internal control. (Ethic code: 97/6505) Findings: In the mice with polycystic ovary syndrome, hydatid cysts were formed in the ovaries. Furthermore, serum FSH hormone levels decreased in the affected mice, while LH and testosterone levels elevated, compared to those in the control mice (P<0.001). The expression of Sirtuin-3 was reduced in the ova of mice with polycystic ovary syndrome, compared to that in healthy mice in the ratio of 0.18 (P<0.05). Discussion & Conclusion: The result of the present study showed that the expression of the Sirtuin-3 gene was decreased in the ovum of mice with polycystic ovary syndrome. Moreover, the disrupted expression of the Sirtuin-3 in the ovum can be suggested as one of the causes of reduced quality of the ovum in patients with polycystic ovary syndrome