ارزيابي اثرات ضد ميكروبي كيتين‌ و‌كيتوزان استحصالي از ميگوي اروپايي(Palaemon elegans) در درياي خزر

The antimicrobial of chitin and chitosan extracted from shrimp shell (Palameon elegans)

ميگوي اروپايي (Palaemon elegans) از سخت پوستان ساكن درياي خزر است. كيتين و شكل دانسيته آن (كيتوزان) يك پليمر­طبيعي با خاصيت ضد­ميكروبي است كه به­ طور طبيعي در اسكلت­ خارجي سخت پوستاني مانند ميگو وجود دارد.­ از كيتين ­و­كيتوزان به­ طور گسترده در صنايع داروسازي،آرايشي­ و ­بهداشتي­،كشاورزي، زيست ­پزشكي و­غذايي استفاده مي­ شود. جهت انجام اين مطالعه با نمونه‌بردار دريچ 977 قطعه ميگوي P. elegans با ميانگين طول­كل 17/06±34/96 ميلي­متر و وزن0/168±1/17 گرم درسواحل استان­ گيلان صيد شدند. ميگوها در كيسه­ هاي زيپ­ دار حاوي­ يخ به آزمايشگاه منتقل و بر­اساس كليد­شناسايي سخت­ پوستان شناسايي شدند. پوسته ميگو از ضايعات گوشت به صورت دستي جداسازي و سپس پوسته ­هاي تميز­شده جهت آبگيري ­و­خشك­ شدن در­محيط با تهويه مناسب قرار داده شدند. پس از خشك­ كردن، پوسته ­ها آسياب و الك شده وحذف تركيبات معدني با استفاده از اسيدكلريدريك 2 نرمال، حذف تركيبات ­پروتئيني با هيدروكسيدسديم 5%، حذف تركيبات رنگدانه­ اي با هيپوكلريت­سديم 3% انجام شد و درنهايت با حذف گروه­ هاي ­استيل از روي كيتين به دست­آمده كيتوزان حاصل شد. ميزان كيتين ­و­كيتوزان به ­دست آمده از پوسته ميگو به ترتيب 18/9و17/4درصد محاسبه گرديد. خواص ضد­ميكروبي كيتين ­و­كيتوزان استخراج ­شده روي 5 سويه ­ي باكتريايي به روش انتشار ديسك و بر­اساس دستورالعمل NCCLS مورد بررسي قرارگرفت. در نتايج اختلاف معني­ داري در حساسيت باكتري­ هاي گرم ­مثبت با گرم ­منفي در كيتين­ و­كيتوزان در پوسته ميگو وجود­ داشت (0/05>p). محدوده­ي حداقل­ غلظت­ بازدارندگي (MIC) وحداقل غلظت ­باكتري­كشي(MBC) براي كيتين به ­ترتيب بين500- 125 و1000-250 ميكروگرم ­بر­ليتر بود. محدوده­ي حداقل غلظتMIC و MBCبراي كيتوزان به­ ترتيب بين500- 250 و1000-500 ميكروگرم ­بر­ليتر بود. بيشترين هاله عدم رشد باكتري در كيتين ­و­كيتوزان در K. Pneumonia به ترتيب 0/08± 10/56 و 0/24± 15/16ميلي متر بود. كيتوزان نسبت كيتين از هاله عدم رشد بيشتري برخوردار بود. نتايج اين بررسي نشان داد كه كيتين و كيتوزان بدست آمده قابليت ضد باكتريايي مناسبي داشته و اين قابليت وجود دارد كه از خواص ضد ميكروبي آن در صنايع غذايي و دارويي استفاده شود.

Palaemon elegans are distributed over a wide coastline of ocean and sea waters. distilled form (chitosan) is a natural polymer with antimicrobial properties that is naturally present in the exoskeleton of crustaceans, including shrimp. Chitin and chitosan are widely used in the pharmaceutical, cosmetic, agricultural, biomedical, food preparation and storage industries. 977 pieces of P. elegans shrimp with an average total length of 34.96 mm and a weight of 1.17 gr were caught on the shores of Guilan province with a sampling drij. The shrimps were transported to the laboratory in zippered bags containing ice and identified as crustaceans. Shrimp shells were separated from meat waste manually, then the cleaned shells were placed in a well-ventilated environment for dehydration and drying. After drying, the shells were ground and passed through a sieve.Elimination of mineral compounds was achieved by using 2Normal hydrochloric acid, removal of protein compounds with 5% sodium hydroxide, removal of pigment compounds with 3% sodium hypochlorite and finally removal of acetyl groups from the chitin obtained from chitosan.Chitin and chitosan obtained from shrimp shell were calculated 18.9% and 17.4%, respectively.The antimicrobial properties of the extracted chitin and chitosan on 5 bacterial strains were investigated by disk diffusion method according to NCCLS instructions. There was a significant difference in the susceptibility of gram-positive and gram-negative bacteria in chitin and chitosan in shrimp shell (P <0.05). The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) for chitin were between 125-500 and 250-5000 micrograms per liter, respectively. The minimum concentration ranges of MIC and MBC for chitosan were between 250-1000 and 500-1000 μg / l, respectively. The highest inhibition of bacterial growth (mm) in chitin and chitosan in K. pneumonia was 10.56 ± 0.08 and 15.16± 0.24, respectively. Chitosan had a higher growth inhibition ratio than chitin.