عنوان مقاله :
ارزيابي خصوصيات كلاژن پوست ماهي كپور نقرهاي (Hypophthalmichthys molitrix) بازيافت شده به روش رسوب ايزوالكتريك
عنوان به زبان ديگر :
Evaluation of silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) skin collagen characteristics recovered by the isoelectric precipitation method
پديد آورندگان :
فرعليزاده، سپيده دانشگاه گيلان - دانشكده منابع طبيعي، صومعه سرا، ايران , زكي پور رحيم آبادي، اسحق دانشگاه گيلان - دانشكده منابع طبيعي - گروه شيلات، صومعه سرا، ايران , بهرامي، هژير دانشگاه اميركبير - دانشكده مهندسي نساجي - گروه شيمي و علوم الياف، تهران، ايران , حسن نيا، صادق دانشگاه تربيت مدرس - گروه بيوشيمي، علوم زيستي، تهران، ايران
كليدواژه :
رسوب ايزوالكتريك , ماهي كپور نقرهاي , كلاژن نوع Ι , حلاليت , بازيافت پروتئين , ضايعات
چكيده فارسي :
هدف از اين مطالعه استفاده از ضايعات پوست ماهي كپور نقرهاي به عنوان منبع بالقوه كلاژن و بازيافت كلاژن محلول در اسيد و آنزيم به روش رسوب ايزوالكتريك و بررسي خصوصيات فيزيكو-شيميايي آن بود. از اين رو، كلاژن از پوست ماهي كپور نقره اي به روش اسيدي و آنزيمي استخراج شد. سپس كلاژن هاي محلول با استفاده از روش هاي رسوب ايزوالكتريك (كلاژن محلول در اسيد (I-ASC) و كلاژن محلول در پپسين (I-PSC)) و Salting- out ( كلاژن محلول در اسيد (ASC) و كلاژن محلول در پپسين (PSC) بازيافت شدند. نتايج نشان داد بازده استخراج و محتوي پروتئين كل در نمونه هاي ASC و PSC نسبت به نمونه هاي I-ASC و I-PSC بيشتر بودند. اما بازده توليد در نمونه ها مشابه بود. خلوص بالا در كلاژن هاي I-ASC و I-PSC محتوي پروتئين كل و بازده استخراج متفاوت و بازده توليد مشابه را توجيه كرد. الگوي SDS-PAGE، ساختار I-ASC و I-PSC را بهعنوان كلاژن نوع Ι تاييد كرد. علاوه براين بررسي تركيب اسيد آمينه، محتوي ايمينو اسيد بالاتر را براي I-PSC نشان داد. دماي تخريب حرارتي براي نمونه هاي I-ASC و I-PSC به ترتيب 28/70 و 29/99 درجه سانتيگراد تعيين شد. در نهايت بررسي حلاليت كلاژن در سطوح مختلف pH و غلظت هاي مختلف NaCl نشان داد كه حلاليت با افزايش غلظت يوني محلول كاهش و در pH بالا و پايين نقطه ايزوالكتريك افزايش مي يابد. به طور كلي نتايج نشان داد رسوب ايزوالكتريك كلاژن محلول، پروتئين كلاژن با خلوص بالا را توليد مي كند كه ميتواند به عنوان يك جايگزين بالقوه كلاژن براي كلاژن پستاندارن باشد.
چكيده لاتين :
The aim of this study was using the silver carp skin wastes as a potential source of collagen and recovering the soluble collagen in acid and enzyme solution by isoelectric precipitation method. The physicochemical properties of produced collagen investigated as well. Hence, collagen was extracted from the skin of silver carp by acidic and enzymatic methods. Then, soluble collagens were recovered using isoelectric precipitation (Isoelectric-Acid-soluble collagen (I-ASC) and Isoelectric-Pepsin-soluble collagen (I-PSC)) and salting-out (Acid-soluble collagen (ASC) and Pepsin-soluble collagen (PSC) methods. The results showed that the extraction yield and total protein content of ASC and PSC samples were higher than I-ASC and I-PSC samples. But the production yield was the same in all the samples. The high purity of I-ASC and I-PSC collagens represented different total protein content and extraction yield, however similar production yield. The SDS-PAGE pattern confirmed the structure of I-ASC and I-PSC as type I collagen. In addition, the amino acid composition showed high amino acid content for I-PSC. It was estimated that the thermal denaturation temperatures for I-ASC and I-PSC samples laying at 28.70°C and 29.99°C, respectively. Finally, the investigation of collagen solubility at different pH levels and concentrations of NaCl showed that the solubility decreases with increasing ion concentration of the solution, and increases at the pH above and below the isoelectric point. Overall, the results showed that the isoelectric precipitation of soluble collagen produces a high-purity collagen protein that could be an alternative source to replace mammalian collagens.
