طراحي و ساخت يك پلاسميد عرضه سطحي حاوي قطعه ژني رمزگذار پروتئين E6 نوتركيب ويروس پاپيلوماي انساني تيپ 18 جهت بيان در مخمر Yarrowia lipolytica

مقدمه: ويروس هاي پاپيلوماي انساني (HPV) با بيش از 100 تيپ، به دو دسته با ريسك پايين و بالا تقسيم مي شوند كه تيپ هاي 16 و 18 به‌تنهايي در 70% موارد سرطان گردنه رحم دخيل اند. در حال حاضر، توسعه پروتئين هاي نوتركيب HPV با هدف واكسيناسيون يا درمان مورد توجه دانشمندان مي‌باشد. از اين رو، مطالعه حاضر با هدف ساخت يك پلاسميد نوتركيب عرضه‌كننده در سطح رمزگذار پروتئين E6 ويروس پاپيلوماي انساني تيپ 18 انجام شد.روش‌كار: قطعه ژني رمزگذار پروتئين E6 تيپ 18 ويروس پاپيلوماي انساني (HPV18) با استفاده از DNA فرد مبتلا به ويروس به‌عنوان الگو، با روش PCR آشيانه اي مورد تكثير قرار گرفت و پس از برش آنزيمي دوگانه Hind III و SfiI، به درون پلاسميد عرضه كننده در سطح pINA1317YLCWP110 همسانه سازي شد.يافته ها: روش هاي مولكولي نظير PCR و برش آنزيمي دوگانه صحت همسانه سازي پلاسميد نوتركيب pINA1317YLCWP110E6 را مورد تأييد قرار داد. همچنين، نتايج به‌دست آمده از تعيين توالي به‌روش سنگر و هم رديفي با داده هاي موجود در بانك ژن منجر به تأييد نهايي صحت توالي، ترادف و چارچوب قرار گرفتن قطعه ژني در جايگاه مناسب گرديد.نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه، همسانه سازي موفق قطعه ژني رمزگذار پروتئين E6 ويروس HPV18 را در پلاسميد عرضه كننده در سطح pINA1317YLCWP110E6 در جايگاه و جهت مناسب مورد تأييد قرار داد. اين پلاسميد در صورت بيان در ميزبان مخمري Yarrowia lipolytica، قابليت استفاده به‌عنوان واكسن، ماركر مولكولي يا جنبه درماني خواهد داشت.