جداسازي، شناسايي و انتخاب باكتري‌هاي اسيد لاكتيك دستگاه گوارش گاوهاي سيستاني جهت توليد پروبيوتيك

سابقه و هدف: شكمبه گاو محل نگهداري بسياري از باكتري‌ها است كه مسئول تبديل مواد غذايي به انرژي هستند. در سال هاي اخير بسياري از ميكروب‌هاي شكمبه با استفاده از توالي يابي ژن 16sRNA شناسايي و جداسازي شده‌اند. بعضي از ميكروب‌ها به عنوان افزودني‌هاي خوراكي براي پيشرفت رشد و توليد حيوانات پيشنهاد مي‌شوند. استفاده از پروبيوتيك‌ها به عنوان افزودني خوراك سبب تعادل مطلوب ميكروفلور روده ميزبان مي‌شود. بنابراين، هدف از انجام اين تحقيق جداسازي، شناسايي و انتخاب باكتري‌هاي اسيد لاكتيك براي توليد پروبيوتيك از شكمبه و مدفوع گاوهاي سيستاني است.مواد و روش ها: در اين آزمايش از شكمبه 12 رأس و مدفوع 4 رأس گاو سيستاني در كشتارگاه صنعتي شهرستان زابل نمونه گرفته شد. نمونه‌هاي اخذ شده به لوله‌هاي آزمايش حاوي محيط كشت MRS مايع منتقل و به مدت 48 ساعت در دماي 39 درجه سانتيگراد گرم خانه‌گذاري شدند. پس از رشد از محيط مذكور بر روي پليت‌هاي حاوي محيط MRS آگار كشت خطي انجام شد و پليت‌ها به مدت 48 ساعت در شرايط هوازي در دماي 39 درجه سانتيگراد گرمخانه گذاري شدند. پرگنه‌هاي ظاهر شده از نظر خصوصيات رشد و مورفولوژي و همچنين، خلوص مورد بررسي قرار گرفتند. باكتري‌هاي گرم مثبت، فاقد اسپور، كاتالاز منفي كروي و ميله‌اي شكل كه هموليز بتا ايجاد نكردند، براي انجام آزمايشات ضد ميكروبي، تحمل به اسيد، نمك صفراوي و حساسيت به آنتي‌بيوتيك‌ها مورد بررسي قرار گرفتند. يافته ها: از تعداد اوليه 158جدايه باكتري اسيد لاكتيك 84 جدايه جهت انجام فعاليت ضد‌ميكروبي عليه چهار گونه باكتري سالمونلا و يك گونه باكتري ( E Coli) Escherichi.coli مورد بررسي قرار گرفتند. سپس جدايه‌هاي حاصل از آزمون ضد‌ميكروبي جهت انجام آزمايش مقاومت به pH بررسي شدند. تعداد 13 نمونه منتخب از اين آزمايش جهت انجام آزمون مقاومت به صفرا مورد مطالعه قرار گرفتند كه از اين تعداد پنج جدايه جهت انجام آزمون حساسيت آنتي‌بيوتيكي مورد بررسي قرار گرفت و به منظور آزمايش ژنتيكي و مولكولي وارد مرحله نهايي شد. آن چه از آزمون مولكولي و توالي ژنتيكي 16sRNA بدست آمد، تنها دو جدايه بود كه بعد از توالي يابي و استفاده از نرم افزار NCBI قرابت ژنتيكي بالايي با دو باكتري Streptoccos infantarius (جدايه A) و Entrococcos faecium (جدايه B) داشت. اين دو جدايه به عنوان پروبيوتيك بالقوه در گاوهاي سيستاني مشاهده شدند. نتيجه‌گيري: نتايج كلي تحقيق نشان داد جدايه‌هاي A و B ويژگي‌هاي مناسبي براي استفاده به عنوان پروبيوتيك دارند. اين ويژگي‌ها شامل نرخ زنده ماني بالا در شرايط pH پايين و غلظت 3 درصد صفرا و همچنين، مقاومت آنتي بيوتيكي و عدم رشد در مواجهه با باكتري‌هاي بيماري‌زايي همچون (E.Coli) Escherichi.coli و Salmonella است. بنابراين، از جدايه‌هاي A و B به عنوان پروبيوتيك در خوراك نشخواركنندگان مي توان استفاده نمود.