بهبود كيفيت اسپرم خروس طي نگهداري در دماي 4 درجه با افزودن كوئرستين به شكل نانو ليپوزوم و NLC در محيط رقيق كننده

مقدمه و هدف: نرخ باروري پايي اسپرم منجمد طيور در مقايسه با ديگر گونه ها، يك چالش جدي براي تلقيح مصنوعي در گله‌هاي تجاري است. اين چالش ممكن است با برخي ويژگي‌هاي فيزيولوژيكي اسپرم طيور مرتبط باشد. از طرف ديگر، تنش‌هاي اسمزي، شيميايي و مكانيكي طي فرآيندهاي سردسازي مهم‌ترين دلايلي هستند كه باعث بوجود آمدن تغييرات فراساختاري، بيوشيميايي و عملكردي در اسپرم مي‌شوند كه نتيجه آن مجموعه اي از پديده هاي آبشاري است كه منجر به كاهش باروري اسپرم خواهد شد. ﮐﻮﺋﺮﺳﺘﯿﻦ يك ﺗﺮﮐﯿﺐ زيست ﻓﻌﺎل ﺑﺎ منشأ ﮔﯿﺎﻫﯽ اﺳﺖ ﮐﻪ ﺑﺎ داﺷﺘﻦ ﺳﺎﺧﺘﻤﺎن ﺷﯿﻤﯿﺎيي ﭘﻠﯽ ﻓﻨﻠﯽ داراي ويژﮔﯽ آنتي اكسيداني اﺳﺖ. اين ﺗﺮﮐﯿﺐ بعنوان يك ﻓﻼوﻧﻮييد ﻣﻬﻢ و يك آنتي ‌اكسيدان ﻗﻮي ﺑﺎﻋﺚ ﺣﺬف راديكال‌هاي آزاد و ﮐﺎﻫﺶ ﺗﻨﺶ اﮐﺴﯿﺪاﺗﯿﻮ در اﺳﭙﺮﻣﺎﺗﻮﮔﻮﻧﯽ جوجه‌ها ﺷﺪ. هدف از اين مطالعه، استفاده از كوئرستين به شكل نانو در رقيق كننده اسپرم خروس طي نگهداري در دماي 4 درجه مي‌باشد. مواد و روشها: بلافاصله پس از جمع‌آوري مني از خروس ها بررسي‌هاي اوليه صورت گرفت. مني جمع‌آوري شده از هر 15 خروس به منظور حذف اثرات فردي با يكديگر مخلوط و به محيط رقيق‏ كننده اضافه شدند.. غلظت‌هاي مختلف كوئرستين (10، 15 و 20 ميكرومولار) در سه شكل (غيرمحافظت شده و در داخل ساختارهاي ليپوزومي و NLC) به تركيب رقيق‌ كننده پايه اضافه شد. سپس سرد شدن تدريجي نمونه‏ هاي مني رقيق شده در دماي C ˚ 4 به مدت 3 ساعت انجام گرديد. سپس در زمان‌هاي صفر (بلافاصله پس از رسيدن نمونه‌ها به دماي 4 درجه سانتيگراد)، 24 و 48  پارامترهاي جنبايي، يكپارچگي غشايي، پراكسيداسيون ليپيدي، درصد اسپرم‌هاي غير طبيعي و درصد زنده‌ماني نمونه ‏ها مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته ها: نتايج بيانگر آن است كه تيمارهاي آزمايشي تأثير معني‌داري بر پارامترهاي مورد ارزيابي در زمان صفر نداشته‌اند. در زمان 24 ساعت نگهداري در دماي 4 درجه، 15 ميكرومولار ﮐﻮﺋﺮﺳﺘﯿﻦ لودشده در NLC باعث بهبود معني‌دار پارامترهاي جنبايي كل، پيش رونده، زنده‌ماني و يكپارچگي غشاي اسپرم در مقايسه با گروه كنترل شد. در زمان 48 ساعت نگهداري در دماي 4 درجه تيمار 15 ميكرومولارﮐﻮﺋﺮﺳﺘﯿﻦ لودشده در NLC باعث بهبود معني‌دار پارامترهاي جنبايي كل، پيش رونده، زنده‌ماني و يكپارچگي غشاي اسپرم در مقايسه با گروه كنترل مي شود. همچنين، نتايج بيانگر آن است كه تيمارهاي آزمايشي تأثير معني داري روي درصد ناهنجاري اسپرم خروس طي نگهداري در دماي 4 درجه در سه زمان 0، 24 و 48 ساعت در مقايسه با گروه كنترل نداشته است. در زمان‌هاي 24 و 48 ساعت نگهداري در دماي 4 درجه تيمار 15 ميكرومولار ﮐﻮﺋﺮﺳﺘﯿﻦ لودشده در NLC باعث كاهش معني‌دار ميزان MDA اسپرم در مقايسه با گروه كنترل شد. نتيجه گيري: نتايج اين آزمايش نشان دهنده آن است كه تيمار 15 ميكرومولار ﮐﻮﺋﺮﺳﺘﯿﻦ لودشده در NLC باعث بهبود بسياري از پارامترهاي مورد ارزيابي ميشود و بنابراين براي استفاده در رقيق‌كننده اسپرم خروس توصيه مي شود.