طراحي و توسعه تكنيك الايزا براي شناسايي IgG عليه نايسريا مننژيتيديس با استفاده از تخليص آنتي‌سرم

سابقه و هدف: نايسريا مننژيتيديس يكي از عوامل منجر به مرگ در كودكان كشورهاي توسعه يافته است. مننگوكوك بر اساس ويژگي هاي سرولوژيكي آنتي ژن هاي كپسولي به 13 سروگروپ طبقه بندي مي شوند. شناسايي سريع باكتري در دوره بيماري سبب انتخاب درمان ضد ميكروبي در اسرع وقت مي شود. هدف از اين تحقيق، تهيه آنتي سرم عليه انواع سروگروپ هاي مننگوكوك با درجه خلوص بالا براي استفاده در تست هاي تشخيصي است. روش كار: نوع مطالعه تحقيق و توسعه است. سوسپانسيون غيرفعال شده باكتري به خرگوش سفيد نيوزيلندي تزريق شد. جمع آوري سرم يك هفته بعد از آخرين تزريق انجام شد. خالص سازي با روش هاي رسوب دهي، تانژنشيال فلوفيلتريشن و كروماتوگرافي انجام شد. از آنتي سرم توليد شده در تست آگلوتيناسيون و طراحي آزمون الايزا استفاده شد. يافته ها: يافته ها نشان داد كه آنتي سرم به دست آمده از لحاظ كيفيت (درجه خلوص بالا، بيشتر از 98درصد) و كميت (غلظت پروتئين مناسب) از درجه بالايي برخوردار است. تست آگلوتيناسيون با آنتي ژن اوليه به صورت 4+ بود. غلظت هاي بهينه براي طراحي آزمون الايزا 1 و 80 ميكروگرم به ترتيب براي آنتي بادي اوليه و بيوتينيله به دست آمد. نتايج ارزش پيشگويي مثبت يا Positive predictive value 100 درصد و ارزش پيشگويي منفي Negative predictive value 96 درصد براي آزمون طراحي شده به دست آمد. نتيجه گيري: تشخيص سريع بيماري به وسيله آزمايش هاي مختلف مانند تست هاي سرمي كه داراي حساسيت، اختصاصيت و سرعت عمل بالا و هزينه كمتري هستند، توصيه مي شود. همچنين با توجه به درجه خلوص بالاي به دست آمده در اين مطالعه، مي توان از اين آنتي سرم در تست هاي مختلف، از قبيل آگلوتيناسيون و الايزا استفاده كرد.