بررسي تأثير باكتري لاكتوباسيلوس برويس بر ميزان بيان ژن‌هاي Rel A ،IKB و Casp3 در سلول‌هاي سرطاني كولون

اهداف: مطالعات نشان داده‌اند كه باكتري‌هاي پروبيوتيك شروع و پيشرفت عوامل سرطان‌زا را ازطريق مسيرهاي مختلف مهار مي‌كنند. هدف ما بررسي تأثير باكتري لاكتوباسيلوس برويس جداسازي‌شده بر بيان ژن‌هاي مرتبط با رشد Rel A, IKB و Casp3 در سلول‌هاي سرطاني كولون HT29 مي‌باشد. مواد و روش ها: در طول اين مطالعه ابتدا باكتري‌هاي پروبيوتيك لاكتوباسيل گونه برويس كشت داده شدند و پس از تهيه كانديشن مديا بر روي سلول‌هاي سرطان HT29 تيمار شدند. اثر سميت سلولي باكتري با استفاده از روش MTT assay (Microculture Tetrazolium Test) مورد بررسي قرار گرفت. با استخراج DNA از سلول‌هاي تيمارشده انجام شد و تست DNA Ladder assay صورت گرفت همچنين تست DAPI براي نشان دادن آپوپتوز سلولي انجام شد. پس از استخراج RNA و تهيه cDNA براي تعيين مكانيسم تأثير اين باكتري بر سيگنالينگ سلولي، بيان ژن‌هاي مرتبط با رشدRel A, IKB) ،Cas3 ) به روش Real-time PCR موردسنجش قرار گرفت. يافته ها: نتايج حاصل از آزمايش MTT  نشان داد كه باكتريه‌اي لاكتوباسيلوس برويس تكثير سلوله‌اي HT29 را مهار كرده و سبب القاي آپوپتوز در اين سلول‌ها مي‌شوند و تكثير ژن Rel A را ازطريق افزايش بيان ژن IKB در اين سلول‌ها مهار مي‌كنند. نتايج دپي و DNA ladder assay حاصل از تيمار سلول‌هاي HT29 با باكتري‌هاي ذكرشده، تغييرات كيفي آپوپتوز سلولي را نشان داد. علاوه‌بر اين، نتايج Real-time PCR نشان داد كه باكتريهاي لاكتوباسيلوس برويس سبب افزايش بيان ژن casp3 در سلول‌هاي سرطاني كولون HT29 شد (0/038=P). نتيجه گيري: يافته‌هاي ما نشان مي‌دهد كه لاكتوباسيلوس برويس مسير سيگنالينگ سلولي آپوپتوز در سلول‌هاي سرطاني كولون HT29 را تحريك كرده و مي‌توان درجهت استراتژي جديد درماني و يا اجوانت تراپي براي تيمار سرطان كولون استفاده كرد.