بررسي تغييرات بيان سايتوكاين‌ها در موش‌هاي BALB/c واكسينه شده با واكسن ژني pEGFP-C2-leoA

مقدمه: هليكوباكتر پيلوري (H. pylori) باعث ايجاد تغييرات متوالي در ديواره معده مي‌شود كه با التهاب مخاط معده شروع مي‌شود و در برخي موارد به سرطان معده منجر مي‌گردد. ژن leoA با كد‌كردن GTPase در بيماري‌زايي اين باكتري در مخاط معده نقش حياتي دارد. وزيكول‌هاي ترشحي محصول ژن leoA باعث انتشـار سـم و تحريك سيستم ايمني در بدن ميزبان مي‌شود. هدف از پژوهش حاضر، ارزيابي واكسن ژني pEGFP-C2-leoA بر تغييرات بياني سايتوكاين‌هايي نظير IL6، IL4 و اينترفرون گاما در التهاب ناشي از عفونت هليكوباكتر پيلوري در مدل موشي بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي ابتدا پلاسميد نوتركيب (pEGFP-C2-leoA) از طريق ترانسفورماسيون به سلول‌هاي مستعد باكتريايي، توليد، تكثير و استخراج شد. سپس غلظت‌هاي مناسب از محلول يك درصد نانو ذرات كيتوزان جهت تزريق به عضله چهار سر ران موش‌هاي BALB/c تهيه گرديد. در نهايت بيان ژن و تغييرات سايتوكاين‌هاي نام‌برده توسط روش Real Time RT-PCR اندازه‌گيري شد، نتايج به‌دست‌ آمده به‌وسيله‌ نرم‌افزار SPSS version 16 مورد تحليل آماري قرار گرفت؛ از آزمون  ANOVAيك‌طرفه و آزمون متعاقب LSD و نيز آزمون  t-test مستقل، جهت بررسي و وجود ارتباط و ميزان معني‌داري داده‌ها استفاده گرديد.نتايج: پس از تزريق واكسن درون عضله‌ چهار سر ران موش‌ها در طول دوره درمان، سايتوكاين‌هاي IFNᵧ (P 0/038) و IL6 (P 0/049) به‌طور معني‌داري افزايش بيان نشان دادند. از طرفي سايتوكاين IL4 و ژن leoA نيز كاهش بيان معني‌داري نشان دادند (0/042 P). نتيجه‌گيري: بر پايه نتايج حاصل، ژن leoA كلون شده در وكتور بياني pEGFP-C2، توان بيان و توليد محصول پروتئيني اختصاصي اين ژن در سلول‌هاي يوكاريوتي را دارد و با توجه با نتايج به‌دست ‌آمده در مدل حيواني و با توجه ‌به خصوصيت ايمني به‌دست ‌آمده در اين تحقيق نشان مي‌دهد كه سازواره نهايي pEGFP-C2-leoA از پتانسيل لازم براي بررسي ايمني‌زايي در مدل انساني به‌عنوان واكسن ژني برخوردار است.