مقايسه دو روش خالص‌سازي بتا توكسين كلستريديوم پرفرنژنس تيپ B

كلستريديوم پرفرنژنس يك باكتري بي‌هوازي است كه از بين سويه‌هاي آن فقط تيپ B و C مي‌توانند بتا توكسين را توليد كنند. بتا توكسين نقش مهمي در بسياري از بيماري‌هاي انسان و حيوان دارد و تأثير مهلكي بر روده مي‌گذارد. مطالعه‌ي حاضر با هدف مقايسه دو روش خالص‌سازي براي استخراج بتا توكسين از كلستريديوم پرفرنژنس تيپ B انجام شد. به‌عنوان روش اول، بتا توكسين با استفاده از رسوب سولفات آمونيوم، كروماتوگرافي ستوني (سفادكس G-25) و كروماتوگرافي تعويض يوني خالص‌سازي شد، در حالي كه در روش دوم از كروماتوگرافي افينيتي استفاده شد. فعاليت هموليزي و مقدار پروتئين در هر مرحله از خالص‌سازي اندازه‌گيري شد. خلوص بتا توكسين در هر مرحله با استفاده از الكتروفورز SDS-PAGE بررسي شد. با توجه به نتايج مقايسه اين دو روش نشان داد كه بازده روش اول 82.8 درصد و بازده روش دوم 90.1 درصد بود. مقادير فعاليت ويژه براي روش اول و دوم به‌ترتيب  U/mg2368.1 و U/mg 164.5 محاسبه شد. نتايج ما نشان مي‌دهد كه كروماتوگرافي افينيتي مي‌تواند براي خالص‌سازي بتا توكسين از كلستريديوم پرفرنژنس تيپ B با خلوص بالا و نسبت فعاليت به پروتئين (HU/mg 4370) استفاده شود.