مطالعۀ تأثير كروسين زعفران بر آپوپتوز و يا زنده‌ماني رده سلول‌هاي سرطاني سينه MCF7 و بيان ژن‌هاي مسير سيگنالينگ PTEN/AKT1

مقدمه: نتايج تحقيقات طب جديد نشان داده است كه مي‌توان از متابوليت‌هاي ثانويـۀ زعفران در توليـد داروهاي مكمل مرتبط با درمان انواع سرطان‌هاي انساني استفاده كرد. كلالۀ زعفران به شكل اختصاصي رشد و تكثيـر سلول‌هاي سـرطاني را مهـار مي‌كند، درحالي‌كه بر رشد سلول‌هاي طبيعي بي‌تأثير است؛ همچنين مصرف اين ماده به كاهش عوارض جانبي ناشي از شيمي‌درماني منجر مي‌شود؛ بنابراين، تحقيق حاضر به‌منظور مطالعۀ اثر كروسين زعفران بر رشد و آپوپتوز سلول‌هاي سرطاني سينه و نيز تعيين سازوكار مولكولي آن انجام گرفت. مواد و روش ها: ابتدا سلول‌هاي سرطاني سينه MCF7 از مجموعه سلولي انستيتو پاستور ايران تهيه گرديد و سپس در داخل محيط كشت RPMI1640 با 10 درصد FBS، درون فلاسك كشت داده شدند. به‌منظور تعيين اثر سميت كروسين بر سلول‌هاي سرطاني، تيمار در غلظت‌هاي گوناگون و در ساعت‌هاي مختلف صورت گرفت؛ سپس با استفاده از روش آزمايش MTT، تكثير و يا مرگ سلول‌ها مطالعه گرديد. آزمايش رنگ‌آميزي DAPI براي نشان دادن آپوپتوز سلولي انجام شد و استخراج RNA از همۀ تيمارها صورت گرفت. پس از تهيۀ cDNA به‌منظور تعيين سازوكار تأثير كروسين، بيان ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوز PTEN و نيز ژن مسير ضدآپوپتوزي Akt به روش Real-time PCR مطالعه گرديد. يافته‌ها: نتايج به‌دست‌آمده از آزمايش MTT نشان داد كه كروسين تكثير سلول‌هاي MCF7 را مهار مي‌كند و سبب القاي آپوپتوز در اين سلول‌ها مي‌شود. نتايج DAPI تغييرات كيفي آپوپتوز سلول سرطاني را پس از تيمار كروسين نشان داد. علاوه بر اين، نتايج Real-time PCR نشان داد كه كروسين سبب افزايش بيان ژن PTEN (P=0.041) در سلول‌هاي سرطاني سينه MCF7 و نيز كاهش معنا‌دار ژن Akt1 (P=0.038) شد. بحث و نتيجه‌گيري: يافته‌ها نشان داد كه كروسين مسير آپوپتوز در سلول‌هاي سرطاني سينه MCF7 را تحريك مي‌كند؛ بنابراين مي‌توان در جهت راهبرد جديد درماني براي تيمار سرطان سينه، از كروسين استفاده كرد.