جداسازي، تكثير و انتقال ژن VP28 ويروس عامل لكه سفيد ميگو در ميكروجلبك Chlorella vulgaris به روش الكتروپوريشن (تراواسازي الكتريكي)

بيماري لكه‌سفيد يكي از مهمترين بيماري‌ها در پرورش ميگو مي‌باشد كه موجب كاهش توليد و خسارت اقتصادي شديدي در كل دنيا از جمله ايران گرديده است. مرگ ‌و مير ناشي از اين بيماري شديد و بسيار بالا و به 100% طي 103 روز از شروع بيماري مي‌رسد. بر اساس آمارهاي جهاني سالانه در دنيا حدود 300 هزار تن ميگو بر اثر اين بيماري تلف مي‌شود. براي مثال، در ايران در سال هاي 1386,1383, 1394,1387، 1395 و 1398 شيوع اين بيماري خسارات ميلياردي به توليد كنندگان وارد كرد. با توجه به اين‌كه ژن پروتئين ويروسي VP28 يكي از مهم‌ترين پروتئين‌‌هاي پوششي ويروس بيماري لكه سفيد و در چسبيدن و نفوذ به سلول‌هاي ميگو نقش دارد و از آن‌جايي‌كه مهم‌ترين منبع غذايي ميگو در مرحله لاروي ميكروجلبك مي‌باشد، مي‌تواند منبع مناسبي براي ساخت واكسن باشد. در اين تحقيق ژن VP28 به ميكروجلبك انتقال داده شد تا از اين راه كمكي در جهت توليد واكسن خوراكي براي جلوگيري از بيماري لكه‌‌سفيدميگو انجام گيرد. در اين تحقيق نمونه‌هاي ميگو (Penaeus indicus) مشكوك به بيماري سندروم لكه سفيد از استخرهاي پرورشي آبادان (مهرماه 1390) به آزمايشگاه مؤسسه واكسن و سرم‌سازي رازيشعبه اراك منتقل و DNA ژنوميك ويروس با استفاده از روش پروتئيناز K و فنل/كلرفرم استخراج شد. با طراحي آغازگرهاي اختصاصي ژن VP28 به روش PCR تكثير و به داخل وكتور pCAMBIA1304 منتقل و نهايتاً طي فرايند تراواسازي الكتريكي به ميكروجلبك Chlorella vulgaris كه خود يكي از ميزبان‌هاي بسيار مناسب انتقال ژن مي‌باشد، منتقل گرديد.