عنوان مقاله :
بررسي توليد آنتيبادي پليكلونال IgG در پاسخ به تزريق ويروس كشته شده سپتيسمي خونريزي دهنده (VHSv) ماهيان قزلآلاي رنگين كمان (Oncorhyncus mykiss) در خرگوش Oryctolagus cuniculus به منظور توليد كيت تشخيص سريع
پديد آورندگان :
حافظيه ، معصومه دانشگاه آزاد اسلامي واحد علوم و تحقيقات , قاسمي ، محدث سازمان تحقيقات، اموزش و ترويج كشاورزي , كاكولكي ، شاپور سازمان تحقيقات، اموزش و ترويج كشاورزي , كاظم پور ، رضا دانشگاه آزاد اسلامي واحد رودهن
كليدواژه :
قزلآلاي رنگين كمان , ويروس سپتيسمي خونريزي دهنده , آنتيبادي پليكلونال , كيت تشخيص سريع
چكيده فارسي :
آبزيپروري به يكي از بخشهاي پايدار، داراي آيندهاي روشن و اميدبخش براي تامين و تضمين امنيت غذاي انسان تبديل شده كه به دليل نياز به افزايش توليد اين غذاي سلامتي، پرورش متراكم آبزيان مورد استقبال قرار گرفته است كه اين موضوع ميتواند آبزيان را مستعد بيماري بهخصوص انواع ويروسي كند. در سالهاي گذشته بيماري ويروسي VHS خسارات جبرانناپذيري به توليد كنندگان ماهي قزلآلاي كشور وارد نمود . تشخيص سريع بيماري وحذف سريع ماهيان آلوده در مراحل اوليه بيماري، براي كنترل موثر شيوع بيماري و كاهش هدر رفت هزينهها امري ضروري است كه كيتهاي تشخيص سريع در اين خصوص كاربرد خواهند داشت. اين كيتها بر پايه آنتيبادي ساخته ميشوند كه در اين پروژه توليد آنتيبادي پليكلونال IgG عليه ويروسVHS در مدل حيواني خرگوش نيوزلندي (Oryctolagus cuniculus) مورد تحقيق و بررسي قرار گرفت. بدين منظور، از استوك ويروس VHSVIa سويه DK5151 با كد بانك ژني (GenBank Accession No: AF345859) تهيه شده از آزمايشگاه رفرنس اروپا پس از آمادهسازي به عنوان آنتيژن جهت تحريك سيستم ايمني با آدجوانت كامل فروند در 4 تيمار شامل كنترل منفي آب مقطر، تيمار يك، با غلظت 1 سيسي ويروس كامل، تيمار دو، با غلظت 0.5 سيسي ويروس و 0.5 سيسي آدجوانت فروند، تيمار سه، با غلظت 75 صدم ويروس و 25 صدم آدجوانت، تيمار چهار با غلظت 25 صدم ويروس و 75 صدم آدجوانت، به مدت چهار ماه، هر ماه يكبار به صورت IM به 5 گروه سه تايي خرگوشهاي نيوزلندي تزريق، بعد از 15 روز، نسبت خونگيري از وريد كناري گوش اقدام و جذب نوري آنتيبادي (OD) اندازهگيري گرديد كه در طول 4 بار خونگيري ميزان جذب نوري آنتيبادي IgG در بين گروهها تفاوت معنيداري (P 05.0) نشان داد. سپس تخليص آنتيبادي از طريق ستون كروماتوگرافي جذبي پروتئين G سفارز فعال شده Sepharose® 4B) ) انجام و OD آنتيباديهاي تخليص شده با دستگاه Nano 200 Ver1.0 در طول موج 280 نانومتر بهترتيب در تيمار دوم 2.60 و تيمار سوم 2.38 و غلظت آنتيبادي بهترتيب 0.15 ± 1.82 و 0.12±1.67 ميليگرم در ميليليتر محاسبه گرديد. قرار است از اين آنتيبادي در كيت تشخيص سريع اين بيماري استفاده گردد.
عنوان نشريه :
شيلات ايران
عنوان نشريه :
شيلات ايران