ميكروسيال ها و ارتقا بستر كشت سلول: ارزيابي كشت سلول هاي بنيادي اسپرماتوگوني در تراشه هاي ميكروفلوِئيديك

هدف از مطالعه حاضر بررسي زمينه درمان ناباروري مردان مي باشد، زيرا درمان ناباروري در گروه بيماران سرطاني كه تحت درمان با داروهاي گنادوتوكسيك قرار مي گيرند، حائز اهميت مي باشد. هدف اصلي مطالعه صورت گرفته، مقايسه دو گروه متقاوت از روش هاي كشت سلول هاي بنيادي اسپرماتوگونيو بررسي ميزان قدرت تمايز و تكثير اين سلول ها مي باشد. پيوند موفق سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني (SSCs) در بررسي‌هايآزمايشگاهي نيازمند بستر كشت مناسب براي تكثير و تمايز اين سلول‌ها مي‌باشد. ماتريكس خارج سلولي طبيعي ريز محيط مناسبي را براي كشت سلول‌هاي بنيادي فراهم مي‌آورد. در بررسي حاضر، ما در صدد بوديم تا قابليت تكثير و تمايز سلول هاي بنيادي اسپرماتوگوني را در شرايط استفاده از سيستم ميكروفلوئيديك(ex vivo) مورد ارزيابي قرار دهيم. از سويي در اين مطالعه نتايج حاصله را با شرايط كشت در پليت هاي آزمايشگاهي متداول (in vitro)براي قابليت توليد و گسترش SSCs مورد مقايسه قرار داديم. در ابتدا سلول هاي بنيادي اسپرماتوگوني از موش هاي نوزاد را جداسازي كرده و در كشت in-vitroسلول هايجداسازي شده را در پليت هاي كشت بر روي داربست متشكل از هيالورونيك اسيد، كيتوزان و بافت آسلولار شده بيضه كشت داده و در بررسي ex-vivo سلول هاي بنيادي اسپرماتوگونيال استخراج شده را در سيستم ميكروفلوئيديك بدون حضور داربست كشت ميدهيم. در بررسيex vivo، از موش‌هاي نر نوزاد نژاد  NMRIسلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني استخراج گرديد.در ادامه سلول هاي استخراج گرديده در چيپ ميكروفلوئيديك طراحي شده فاقد پمپ خارجي منتقل گرديده اند و پس از مدت يك ماه روند كشت مذكور را با ارزيابيIHC مورد مقايسه و مطالعه قرار داده شد. در نمونه هاي مورد مطالعه استقرار سلول ها در لومن مني ساز، رنگ آميزي DAPI و ايمونوهيستوشيمي ارزيابي گرديده اند. نتيجه بررسي هاي ايمونوهيستوشيمي نشان دهنده ي افزايش معني دار بيان ماركرهايPLZF و TEKT1 در مدل هاي ex-vivoبوده است(P 0.05). در نهايت، نتايج حاصله نشان داد كه قابليت سلول هاي بنيادي اسپرماتوگوني در القا اسپرماتوژنز و توليد سلول هاي هاپلوييد در شرايط كشت بافت بيضه در سيستم ميكروفلوِئيديكاختلاف معني دار در مقايسه باشرايطكشت متداول در پليت هاي آزمايشگاهي براي سلول هاي مذكور دارد. در نهايت سيستم ميكروفلوئيديك قادر است بستر حمايتي براي تكثير و تمايز  SSCها فراهم آورد. به علاوه، تكثير و تمايز اين سلول‌ها در شرايط  ex vivoمي‌تواند شرايطي موثر براي درمان آزواسپرمي فراهم آورد.