بررسي حضور و سطح بيان ژن‌هاي rpoS، relA و mazF در طول تشكيل بيوفيلم در بازه‌هاي زماني مختلف در استافيلوكوكوس اپيدرميديس

سابقه و هدف: استافيلوكوكوس اپيدرميديس پاتوژني فرصت طلب است كه در ايجاد عفونت هاي مرتبط با استفاده از ايمپلنت ها و وسايل پزشكي نقش دارد. تشكيل بيوفيلم از جمله مهم ترين فاكتورهاي بيماري زايي اين ميكروارگانيسم محسوب مي شود كه تا حد زيادي به عوامل مختلفي از جمله پروتئين هاي مختلف بستگي دارد. بنابراين مطالعه حاضر با هدف بررسي سطح بيان سه پروتئين rpoS، relA و mazF در استافيلوكوكوس اپيدرميديس در فواصل زماني مختلف در طول دوره تشكيل بيوفيلم انجام شد. روش كار: در مطالعه مورد شاهدي حاضر حضور ژن هاي rpoS،relA وmazF با استفاده از روش PCR در سويه استاندارد استافيلوكوكوس اپيدرميديس ATCC 12228 بررسي شد. ميزان توليد بيوفيلم به روش ميكروتيترپليت (MTP) بررسي شد. سطح بيان ژن هاي مورد مطالعه پس از 2، 8 و 24 ساعت در طول دوره تشكيل بيوفيلم با استفاده از تكنيك Real- time PCR سنجش شد. داده ها با استفاده از نرم افزار آماريGraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc) تجزيه و تحليل شدند. آزمون واريانس يك طرفه براي بررسي ميانگين تغييرات بيان ژن هاي مورد مطالعه استفاده شد و P-value 0.05 معنادار در نظر گرفته شد. يافته ها: سويه استافيلوكوكوس اپيدرميديس واجد تمام ژن هاي مد نظر بود و داراي قدرت تشكيل بيوفيلم قوي بود. ژن هاي مورد مطالعه سطوح بيان متفاوتي را در فواصل زماني مختلف در طول تشكيل بيوفيلم با روش Real- time PCR نشان دادند. سطح بيان rpoS در 24 ساعت بالاترين ميزان بود (0/252 ± 6/7) (P 0.001). در حالي كه ژن mazF بالاترين سطح بيان را در 8 ساعت (0/208 ± 6) (P 0.001) در طول دوره تشكيل بيوفيلم نشان داد. علاوه بر اين، سطح بيان ژن relA در 2 ساعت (0/361 ± 3/9) (P 0.001) به اوج خود رسيد و سپس در ساعت 8 (0/265± 1/7) و 24 (0/153 ± 1/2) به تدريج كاهش يافت (P 0.05). همچنين نتايج مقايسه ميزان تغييرات بيان ژن rpoS نسبت به ژن relA (1/175 ± 2/667) و همچنين ژن mazF (1/175 ± 0/2333) با استفاده از Dunnett’s multiple comparisons test معنادار نبود (P 0.05). نتيجه گيري: نتايج ما اهميت پروتئين هاي rpoS، relA و mazF را در ايجاد و توسعه ساختار بيوفيلم در سويه مورد بررسي نشان مي دهد. علاوه بر اين، نتايج ما نقش مهم پروتئين rpoS را در طول تشكيل بيوفيلم و اهميت پروتئين relA را در آغاز مراحل تشكيل بيوفيلم نشان داد.