بررسي بيان ژن MYH7 در بافت‌هاي ران، دست و راسته بره‌هاي پرواري نژاد كرماني

هدف: ماهيچه هاي اسكلتي حدود 40 درصد وزن بدن را تشكيل مي‌دهند و عملكردهاي زيادي، مانند حفظ انرژي مورد نياز، حفظ وضعيت بدني و محافظت از بافت‌هاي نرم را به عهده دارند. رشد طبيعي ماهيچه‌هاي اسكلتي پيش نياز حيوانات براي حفظ فعاليت‌هاي طبيعي زندگي و متابوليسم است و هر گونه رشد غير طبيعي ماهيچه‌ها منجر به بيماري مي‌شود. بر اساس تجزيه و تحليل پروفايل هاي بيان ژن در ماهيچه اسكلتي ژن MYH7 به عنوان ژن كانديداي مربوط به انقباض عضلاني شناسايي شده است. هدف اين مطالعه، بررسي بيان ژن MYH7 در بافت‌هاي ران، دست و راسته بره‌هاي پرواري نژاد كرماني بود.مواد و روش‌ها: در پژوهش حاضر نمونه برداري از شش راس بره نر كرماني  از بافت‌هاي ران، دست و راسته با سه تكرار در هنگام كشتار انجام شد و  تعداد كل 54 نمونه‌ به دست آمد. RNA كل با استفاده از كيت استخراج (شركت دنازيست) انجام شد.  كيفيت و كميتRNA  استخراج شده با روش الكتروفورز روي ژل آگارز 2 درصد و با استفاده از دستگاه نانودراپ مورد ارزيابي قرار گرفت. براي سنتز  cDNAاز روي RNA استخراج شده از كيت سنتز cDNA شركت parstous استفاده شد. از واكنش real time PCR به روش Syber Green براي بررسي ميزان نسبي بيان ژن‌ها استفاده شد. از روش Pfaffl et al. (2002) براي تجزيه و تحليل داده هاي حاصل از real time PCR استفاده شد.نتايج: نتايج بررسي كيفيت RNA هاي استخراج شده در طول موج A260/A280 نشان داد كه كيفيت 8/1-9/1 مناسب و مطلوب است. به علاوه، مشاهده دو باند 18S و 28S براي RNA روي ژل آگارز نشان داد كه RNA سالم است و نبود باند اضافي روي ژل نشان داد كه RNA استخراج شده خالص است. نتايج منحني هاي real time PCR و الكتروفورز محصولات PCR روي ژل آگارز (2 درصد) نشان داد كه ژن MYH7 در بافت هاي دست، ران و راسته بره‌هاي نر كرماني تكثير و بيان مي‌شود. در بافت‌هاي دست، ران و راسته باند 283 جفت بازي براي ژن MYH7 و براي ژن بتااكتين باند 112 جفت بازي در همه نمونه ها مشاهده شد. اين مشاهدات نشانگر اين بود كه آزمايش صحيح انجام شده است و قطعات مورد نظر به درستي تكثير شده‌اند. نتايج حاصل از اين پژوهش نشان داد كه اين ژن در سه بافت دست، ران و راسته بيان مي‌شود.نتيجه‌گيري: در پژوهش حاضر مشخص شد كه ژن MYH7 در بافت‌هاي ماهيچه‌هاي ران، دست و راسته بيان مي‌شود. لذا، مي‌توان نتيجه گرفت كه ژن MYH7 در ماهيچه‌هاي مختلف، كه براي توليد بيشتر گوشت در نژادهاي گوشتي بسيار ضروري هستند نقش ايفا مي‌كند.