بررسي تأثير آنتي‌ژن توموري MAGE-A3 برفعاليت اونكولايتيكي ويروس رئو در رده‌هاي سلول توموري كولوركتال

سابقه و هدف: سرطان كولوركتال سومين دليل بدخيمي شايع و چهارمين دليل مرگ‌ومير ناشي از سرطان در سراسر جهان است .اگرچه بسياري از درمان‌ها از جمله جراحي، پرتودرماني و شيمي‌درماني براي آن استفاده مي‌شود، ولي با توجه به مؤثر نبودن آنها تحقيق‌ها روي ساير روش‌ها درحال انجام است. استفاده از آنتي‌ژن‌هاي توموري عليه تومور يكي از انواع روش‌هاي درماني است كه در همراهي با ساير روش‌هاي درماني مي‌تواند سبب تحريك بهتر سيستم ايمني عليه تومور شود. استفاده از ويروس‌هاي انكولايتيك با ويژگي طبيعي در از بين بردن سلول‌هاي سرطاني زمينه گسترده‌اي را براي مطالعه‌هاي بيشتر فراهم كرده است. هدف از اين پژوهش بررسي تأثير آنتي‌ژن توموري MAGE-A3 بر فعاليت اونكولايتيكي ويروس رئو در رده‌هاي سلول توموري كولوركتال است. روش كار: در اين مطالعه تجربي از سلول L929 كه جزو رده سلولي فيبروبلاست است به عنوان سلول ميزبان براي تكثير رئوويروس استفاده شد. تيتر رئو ويروس با روش CCID50 تعيين و تيتر مناسب براي مطالعه انتخاب شد. پلاسميد بيان كننده MAGEA3 به سلول‌هاي سرطان كولوركتال با منشأ موشي (CT26) و انساني (Caco2) ترانسفكت شده و با ويروس رئو (1 = MOI و 0/01 = MOI) آلوده شدند. 24 ساعت بعد از تلقيح رئوويروس و مشاهده CPE سلول‌ها براي بررسي آپوپتوز جمع شدند و با روش فلوسايتومتري سنجيده شدند. يافته‌ها: ميزان آپوپتوز در سلول CT26 در حضور وكتور بيان‌كننده MAGE-A3 و آلوده شده با ويروس رئو (در 1 = MOI 3/8 ± 38/5درصد و 0/02 p-value / در 0/01 = MOI 2/1 ± 30 درصد و 0/005 p-value) نسبت به نبود وكتور بيان‌كننده MAGE-A3، (در 1 = MOI 0/9 ± 22/4درصد و 0/01 = MOI 0/3 ± 15/8درصد) بيشتر بود. از طرفي ميزان آپوپتوز در سلول Caco2 در حضور وكتور بيان‌كننده MAGE و آلوده شده با ويروس رئو (در 1 = MOI 1/8 ± 22/5درصد و/ p-value = NS در 0/01 = MOI 2 ± 11 درصد و p-value = NS) نسبت به نبود وكتور بيان‌كننده MAGE-A3، (در 1 = MOI 2/7 ± 45/5 درصد و 0/01 = MOI 0/9 ± 11/5درصد) كمتر بود. مي‌توان چنين بيان كرد كه با توجه به نتايج حاصل از اين مطالعه تأثير سيتوليز توسط ويروس رئو در رده سلوليCaco2 بيشتر از سلول CT26 است و همچنين ميزان كشندگي سلول در حضور وكتور بيان‌كننده MAGE-A3 در سلول CT26 تقريبا دو برابر حالتي است كه اين وكتور در سلول Caco2 وجود دارد. نتيجه‌گيري: با توجه به ميزان كشندگي بالاتر ويروس در سلول‌هاي Caco2 و وضعيت ژن‌هاي P53 و Ras در اين سلول به نظر مي‌رسد كه P53 موتانت ولي Ras فعال است، ويروس فعاليت بيشتري داشته و حضور MAGE-A3با كاهش فعاليت Ras، از فعاليت ويروس مي‌كاهد.