جداسازي سويه باسيلوس G362 نمك‌دوست نسبي از چشمه‌ آب گرم گراب در شمال شرق ايران و تعيين خصوصيات اندوگلوكاناز پايدار در حرارت و طيف وسيع pH آن

پايداري آنزيم‌ها به حرارت و pH از مهم‌ترين شاخصه‌هاي تعيين‌كننده در كاربرد آنهاست. در اين تحقيق دستيابي به سلولاز پايدار در برابر حرارت و pH، با غربالگري در يكي از چشمه‌هاي گراب واقع در شمال شرق ايران هدف‌گذاري شد.نمونه‌هاي جمع‌آوري‌شده از يكي از چشمه‌‌هاي آب گرم گراب، در استان خراسان رضوي در ايران، براي جداسازي، ارزيابي و شناسايي باكتري‌هاي قادر به توليد سلولاز پايدار در برابر حرارت استفاده شدند. كشت‌ها در دماي 45 درجه سانتي‌گراد و در شرايط هوازي گرمخانه‌گذاري و جدايه‌ها روي محيط CMC آگار جداسازي شدند. غربالگري اوليه جدايه‌ها مبتني بر محيط كشت اختصاصي، تحمل‌پذيري به نمك و دما انجام شد. سپس غربالگري تكميلي آنها با ارزيابي فعاليت اندوگلوكانازي در دماها و pH مختلف به روش كيفي و كمي سنجش انجام شد. در نهايت، شناسايي مولكولي جدايه‌ انتخابي با روش تعيين توالي ژن 16S rRNA انجام شد. نتايج حاصل از اين تحقيق منجر به معرفي سويه انتخابي نمك‌دوست نسبي با نام انتسابي G362 Bacillus sp. با پايداري قابل توجه فعاليت اندوگلوكانازي در دماي 55 درجه سانتي‌گراد و پايداري در طيف وسيعي از  pH اسيدي و قليايي شد. چشمه‌ مطالعه‌شده مانند برخي از چشمه‌هاي آب گرم ايران داراي باكتري مولد سلولاز است كه سويه منتخب اين تحقيق، با قابليت رشد در نمك 6 درصد و توليد آنزيم اندوگلوكاناز مقاوم به حرارت و پايداري عملكردي بالا در طيف وسيع  pHقليايي و اسيدي مي‌تواند براي مطالعات بيشتر به كار گرفته شود. علاوه بر اين، ژن اختصاصي اندوگلوكاناز جدايه G362 Bacillus sp. را مي‌توان شناسايي مولكولي كرد و براي تحقيقات بيشتر از جمله مطالعات ساختاري استفاده نمود. حتي ممكن است به‌عنوان يك الگوي پروتئين در مهندسي پروتئين استفاده شود.