شماره ركورد
1384468
عنوان مقاله
بهينه سازي آنتيبيوتيك مورد استفاده در همكشتي به منظور كنترل باكتري Agrobacterium tumefaciens و افزايش بازده تراريختي گياه اطلسي (Petunia hybrida)
پديد آورندگان
خادم ، آزاده سازمان جهاد دانشگاهي خراسان رضوي - پژوهشكده بيوتكنولوژي صنعتي - گروه پژوهشي بيوتكنولوژي گياهان باغباني , سرگزي مقدم ، زهرا دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و بهنژادي گياهي , يزدي ، محبوبه دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و بهنژادي گياهي , خرازي ، مهديه سازمان جهاد دانشگاهي خراسان رضوي - پژوهشكده بيوتكنولوژي صنعتي - گروه پژوهشي بيوتكنولوژي گياهان باغباني , شريفي ، احمد سازمان جهاد دانشگاهي خراسان رضوي - پژوهشكده بيوتكنولوژي صنعتي - گروه پژوهشي بيوتكنولوژي گياهان باغباني
از صفحه
353
تا صفحه
366
كليدواژه
رشد باكتري , رشد گياهچه , سفوتاكسيم , سفتي زوكسيم , محيط كشت
چكيده فارسي
انتقال ژن با واسطه باكتري Agrobacterium tumefaciens يكي از روش هاي شناخته شده با هدف توليد گياهان تراريخته است. موفقيت در اين روش بستگي به نحوه رشد باكتري و باززايي ريزنمونه هاي گياهي دارد. در اين ميان، آنتي بيوتيك ها به عنوان تنظيم كننده هاي رشد باكتري عمدتا اثرات بازدارندگي بر روي رشد گياه دارند. از اين رو معرفي يك روش انتقال ژن موفق با واسطه آگروباكتريوم نيازمند شناسايي آنتيبيوتيك داراي اثر بازدارندگي رشد بر باكتري و نيز كمترين تاثير بر باززايي ريزنمونه هاي گياهي و رشد گياهان تراريخته است. در اين راستا اين پژوهش با هدف بهينه سازي آنتيبيوتيك مورد استفاده در هم كشتي به منظور افزايش بازده تراريختي گياه اطلسي (Petunia hybrida) انجام شد. بدين منظور ابتدا ميزان رشد باكتري A. tumefaciens در محيط كشت هاي مختلف داراي دو pH مناسب براي رشد گياه (5.7) و رشد باكتري (7) در حضور غلظت 500 ميليگرم در ليتر آنتي بيوتيك سفوتاكسيم به عنوان آنتي بيوتيك رايج به منظور كنترل رشد باكتري مورد بررسي قرار گرفت. نتايج حساسيت سنجي باكتري نشان داد كه نوع و غلظت نمك و pH محيط كشت بطور معنيداري بر ميزان رشد باكتري تاثيرگذار است، بطوري كه بيشترين ميزان رشد باكتري در محيط كشتهاي LB و MH در pH= 7 مشاهده شده اما بر خلاف آن هيچ گونه رشدي در محيط كشت MS مشاهده نشد. علاوه بر آن، دو آنتي بيوتيك سفوتاكسيم و سفترياكسون در غلظت 700 ميليگرم در ليتر داراي بيشترين اثر بازدارندگي بر رشد باكتري بودند. آزمايش دوم به منظور بررسي اثر آنتي بيوتيك بر روي باززايي ريزنمونه هاي برگ گياه اطلسي انجام شد. نتايج اين آزمايش نشان داد كه آنتي بيوتيك هاي مختلف اثرات متفاوتي بر باززايي ريزنمونه ها و رشد گياهچه حاصل از آنها دارند. طبق اين نتايج بيشترين حجم كالوس و درصد باززايي در حضور آنتي بيوتيك هاي سفتيزوكسيم و كوآموكسيكلاو در هر سه غلظت و سفپيم در غلظت 300 ميليگرم در ليتر مشاهده گرديد. بيشترين تعداد گياهچه نيز در تيمار سفتيزوكسيم در غلظت هاي 300 و 500 ميليگرم در ليتر با ميانگين 7.70 گياهچه بود. در ارتباط با صفات رشدي گياهچه، بيشترين تعداد و طول ريشه در هر گياهچه به ترتيب در تيمار سفتيزوكسيم در غلظت 300 ميليگرم در ليتر و سفوتاكسيم در همين غلظت مشاهده شد. بيشترين وزن خشك متعلق به گياهچههاي رشديافته در حضور آنتي بيوتيك كوآموكسيكلاو و پس از آن آنتي بيوتيك سفتيزوكسيم (mg/l 300) بود. مجموع نتايج اين آزمايش ها نشان مي دهد گياهچه هاي رشد يافته در حضور آنتي بيوتيك سفتيزوكسيم از رشد مناسبي برخوردار بودند در حاليكه استفاده از اين آنتي بيوتيك در بازدارندگي رشد A.tumefaciens موثر بود. از اينرو كاربرد آنتي بيوتيك سفتيزوكسيم در فرآيند هم كشتي در افزايش بازدهي انتقال ژن موثر خواهد بود.
عنوان نشريه
توليدات گياهي
عنوان نشريه
توليدات گياهي
لينک به اين مدرک