تجزيه و تحليل بيان ژن‌هاي كانديدا در بخش‌هاي سفيد و تيره بافت پوست در گوسفند لري بختياري

در گوسفندان نژاد لري بختياري، وجود لكه‌هاي سياه بر روي پوست منجر به كاهش كيفيت پشم استحصالي مي‌شود. اساس مولكولي و ژن هاي دخيل در رنگ پوشش برخي از دام ها از جمله گوسفندان تا حدودي شناسايي شده است. از اين رو، هدف از انجام اين مطالعه، بررسي بيان ژن هاي گيرنده ملانوكورتين-1 (MC1R)، پروتئين سيگنال دهي آگوتي (ASIP)، فاكتور شبه كروپل4 (KLF4)، و فاكتور رونويسي القاكننده ملانوسيت ((MITF در بخش هاي سفيد و تيره بافت پوست در گوسفندان نژاد لري ‌بختياري بود. براي اين منظور، از تعداد 14 رأس گوسفند با رنگ پوشش سفيد داراي لكه‌هاي تيره (سياه)، نمونه پوست از هر دو بخش سفيد و تيره تهيه و RNA كل استخراج گرديد. براي ارزيابي بيان نسبي ژن‌هاي مورد نظر، از ژن‌هاي β-actin و GAPDH به‌عنوان ژن مرجع جهت نرمال كردن داده ها استفاده گرديد. همچنين، جهت تكثير قطعه اي از ژن هاي مورد مطالعه، با استفاده از توالي mRNA موجود براي اين ژن ها در بانك اطلاعاتي (GenBank)، آغازگرهاي مناسب توسط نرم‌افزار Primer3plus طراحي شدند. در نهايت، از نرم‌افزارهاي BestKeeper و REST 2009 V2.0.13 براي تجزيه و تحليل داده‌هاي بيان ژن استفاده شد. بر اساس نتايج توصيفي، ژن‌هاي MC1R وMITF با ميانگين 30.42 و 25.86 براي مقادير Ct، به‌ترتيب كمترين و بيشترين مقدار بيان را در بين ژن‌هاي هدف در نمونه‌هاي پوستي داشتند. علاوه‌براين، ژن‌هاي مرجع (β-actin و GAPDH) بيشترين پايداري بيان را در بين تمام ژن‌هاي مورد مطالعه داشتند. تفاوت معني‌داري در سطوح mRNA ژن‌هاي MC1R، ASIP، KLF4 و MITF در بافت تيره پوست نسبت به بخش سفيد پوست مشاهده نشد. اگرچه، بيان ژن ASIP در قسمت تيره نسبت به بخش سفيد پوست بيش از دو برابر بود، امّا اين تفاوت ازنظر آماري معني دار نبود. علاوه‌براين، ژن‌ MC1R كمترين تفاوت بيان را در بخش‌هاي سياه و سفيد بافت پوست از خود نشان داد. اين نتايج نشان مي دهد كه سطح بيان اين چهار ژن مورد مطالعه نقشي در ايجاد لكه‌هاي پوستي سياه رنگ در گوسفند نژاد لري بختياري نداشته باشد.